Standardkurva gyldighed: E. coli i TSB vs. Næringsbouillon – ikke udvekselbare

En standardkurva genereret med E. coli dyrket i TSB (Tryptic Soy Bouillon) er IKKE gyldig til kvantificering af E. coli i Næringsbouillon (NB).

Hvorfor mediumet betyder noget for kvantificering

  • Forskellig sammensætning: TSB (rig: kasein/soja peptoner, dextrose) vs. NB (simpelt: pepton, oksekstrakt)
  • Vækstkinetik forskellig: Lagfase, fordoblings tid, maksimal tæthed varierer efter medium
  • Cellefysiologi forskellig: Størrelse, refraktionsindeks, pigmentproduktion påvirker OD₆₀₀
  • Metabolsk aktivitet varierer: Påvirker fluorescens/ATP-baserede assay'er

Konsekvenser af kryds-medium brug

  • Upræcise CFU/mL estimater
  • Systematisk over- eller underestimering
  • Ugyldige statistiske sammenligninger
  • Ikke-reproducerbare resultater

Korrekt praksis

  1. Generer standardkurva i præcis samme medium som eksperimentelle kulturer
  2. Match inkubationsbetingelser (temp, rystning, tid)
  3. Inkluder medium-blanks
  4. Valider linearitetsområde for hvert medium

Medium-specifikke standardkurver er essentielle for præcis bakteriekvantificering. Ekstrapolér aldrig på tværs af medier.

Makrobiotisk diæt