Hvorfor knusning udføres i TCA lipidperoxidationstest?

I thiobarbitursyre-reaktive stoffer (TBARS) assayet for lipidperoxidation udføres knusning af vævsprøven af ​​flere årsager:

For at lette homogenisering:Knusning af vævsprøven hjælper med at nedbryde de cellulære strukturer og frigive lipiderne til det omgivende medium. Denne homogeniseringsproces sikrer, at lipiderne er jævnt fordelt og tilgængelige for reaktion med thiobarbitursyre (TBA).

For at forbedre lipidekstraktion:Knusning af vævsprøven øger overfladearealet af lipiderne, hvilket muliggør bedre ekstraktion i det organiske opløsningsmiddel (normalt en blanding af chloroform og methanol), der anvendes i TBARS-analysen. Dette trin er afgørende for at isolere lipiderne fra andre cellulære komponenter og lette deres reaktion med TBA.

Sådan frigives lipidperoxidationsprodukter:Knusning af vævsprøven kan hjælpe med at frigive lipidperoxidationsprodukter, såsom malondialdehyd (MDA), som ofte er bundet til cellulære proteiner eller andre makromolekyler. Ved at afbryde disse bindinger giver knusning mulighed for frigivelse og efterfølgende kvantificering af MDA og andre TBARS.

Ved at knuse vævsprøven optimeres homogeniseringen, lipidekstraktionen og frigivelsen af ​​lipidperoxidationsprodukter, hvilket fører til mere nøjagtige og pålidelige målinger af lipidperoxidation i TBARS-analysen.