PBMC -protokollen

Kryopræserverede perifere mononukleære blodceller ( PBMC ) er en hyppig kilde til prøver til forskning, der omfatter immunterapier og reaktioner på vacciner. Mens nogle protokoller er begrænset til isolering og frysning faser af processen , mens andre omfatter optøning procedurer. Isolation Procedure og Frysning Procedure

En kommerciel forbindelse til at fremme adskillelsen er placeret i hver 50 ml centrifugerør og rørene centrifugeres i tredive sekunder. Caps blod rør sprøjtes med alkohol før åbning , så antikoagulerende behandlet fuldblod overføres derefter via pipette centrifugeglassene . Plasma lag af blodet suges med en pipette.
Frysning

Cellerne fra det forrige trin vil derefter centrifugeres med saltvand tre gange . Efter en celletælling , vil prøverne centrifugeres derefter suspenderet i frysning medium. Prøver i frysemedium er næste delt mellem kryoglas i én ml mængder. Hætteglassene opbevares natten over i en hoteltilbud

-70 º C fryser og flyttede til langtidsopbevaring i flydende nitrogen næste dag.
Safe Optøning

kryoglas overføres fra flydende nitrogen til en 37 º C vandbad og prøven får lov til at tø 01:59 minutter. En varm transport medier sættes til hvert hætteglas. Fortyndet cellesuspension centrifugeres i syv minutter. Kontrolleres Antallet og celleviabilitet , hvis cellerne har brug for at koncentrere sig, er prøver centrifugeres flere syv minutter . Prøven fortyndes til brugsopløsning og hvilede i tolv til atten timer før begynder eksamen i den angivne protokol.
Hoteltilbud