Fremstilling af glukose-oxidase-løsninger: En omfattende guide

Glukose-oxidase er et almindeligt anvendt enzym i analytiske anvendelser, hvor mængden af glukose skal bestemmes. Dens popularitet som reagens stammer fra dets lave omkostninger i forhold til andre reagenser, dets stabilitet både tørret og i løsning, og dets lave fare-niveau. Glukose-oxidase leveres typisk i et assay-kit, der vil have de fleste af de reagenser, du har brug for til at præparere løsningen med nok materialer til at udføre hundrede assays. De følgende trin forklarer, hvordan man præparerer glukose-oxidase; dit kit vil give specifikke instruktioner om, hvordan man udfører hele assayet.

Ting, du har brug for

• Bægere
• Kaliumfosfat (KH2PO4)
• Destilleret vand
• Rørplade
• pH-meter
• 1M Kaliumhydroxid-løsning
• Glukose-oxidase
• Prøverør (valgfrit)

Instruktioner

1. Præparer en 0,1M kaliumfosfat-buffer-løsning ved at tilføje 13,6 mg kaliumfosfat (KH2PO4) i 800 ml destilleret vand. Brug 1M kaliumhydroxid til at justere pH til 7,0, tilføj derefter nok destilleret vand for at bringe volumen til 1 L.

2. Tilføj 10 mg glukose-oxidase pr. 1 ml destilleret vand i et separat bæger. Bland med blidt ryst og svingning for at undgå skumdannelse.

3. Tilføj glukose-oxidase til 0,1M kaliumfosfat-bufferen i separate bægre eller prøverør i de forskellige koncentrationer, der er nødvendige til dit assay. Du vil skulle beregne de koncentrationer, du har brug for, baseret på de detektionsniveauer, du prøver at analysere, og antallet af forskellige koncentrationer, du ønsker til din lineære regressionsberegning.