Sådan Label proteasesubstratet Produkter

Proteiner er en komponent i hver celle i kroppen. Proteaser ( også benævnt proteolytiske enzymer eller proteinaser ) er fordøjelsesenzymer , hvis funktion er at nedbryde proteiner. Ud over fordøjelsen, proteaser er også afgørende for dannelse af blodpropper , metabolisk kontrol og immune regulering . Under den biokemiske proces ( katalyse ) , substrater binder til enzymets aktive site og omdannes til et eller flere produkter , der derefter frigives fra stedet. Denne proces kan blive forøget eller hæmmet at øge eller reducere reaktioner i kroppen , afhængigt af det ønskede resultat. Mærkning substrat produkter giver forskerne at måle denne enzymatiske aktivitet . Fluorescerende mærkning er en teknik, der bruges til at farve bestemte molekyler , hvilket gør dem lettere at spore . Ting du har brug
targetmolekyle cocktail
fluorescerende farvestof mærkning kit
fluorescensaflæsning instrument myHotelVideo.com: Vis Flere Instruktioner
Sådan Label proteasesubstratet Produkter
1

Vælg din fluorescerende farvestof . Almindelige farvestoffer omfatter rhodamin og fluorescein . Disse kan som regel købes fra producenterne.
2

Kør reaktionen og fjerne ubrugte fluorophor fra target-molekyler ved hjælp størrelsesudelukkelseschromatografi (en proces , der adskiller molekyler baseret på deres størrelse). Dye Removal Kolonner er også almindeligt anvendt . Disse er ofte reklameres med labeling kits .
3

Detect molekylerne. Brug en fluorescensaflæsning instrument, såsom et fluorescens- mikroskop. På baggrund af en bestemt bølgelængde er passeret gennem molekyle ( indirekte for nogle teknikker ) , lysende fluorophoren .
4

Tag dine målinger. Fordi assays måler enten hvor meget substrat blev forbrugt eller mængden af ​​produkt frigives over en periode, kan måles enzym mængder i mol ( fysisk størrelse ), eller i enzym -enheder ( aktivitet).