| | Sundhed | sygdom |

baculovirus protokoller

   Baculoviruses er stavformet virus ofte findes i insekter , især af ordren Lepidoptera , som omfatter møl og sommerfugle , ifølge George Rohrmann , Ph. D. i Baculovirus Molekylær Biologi . Studiet af baculovirus 'udtryk hos insekter er vant til at undersøge nye menneskelige vacciner mod kræft og andre alvorlige sygdomme , samt produktion af bio-insekticider . Sådanne eksperimenter med baculovirus inddrage laboratorium protokoller eller standardmetoder , såsom vedligeholdelse og Kultur Insect celler , Generation af rekombinant Baculoviruses af Direct Kloning og forberedelse af Baculovirus Stocks.

Vedligeholdelse og Kultur Insect celler

Det grundlæggende protokol bruges til at vokse og fastholde insekt celler kulturer , der er nødvendige for at udvikle mange eksperimenter med baculovirus . Ifølge de nuværende protokoller , denne metode kræver et medium med føtalt bovint serum , metaller og mælkealbumin hydrolysat , også kendt som TNM-FH ; celler udvundet fra ovarier af møl falder armyworm ( Spodoptera frugiperda ) ; 70 procent ethanol , 0,4 procent trypan blåsplint farvestof ; serumfrit insekt cellekulturmedium ; grundlæggende laboratorieglasudstyr og udstyr , såsom en centrifuge med vandret rotor og en flydende nitrogen fryser . Celletælling udføres ved hjælp af en enhed kaldet hæmacytometer .

generation af rekombinant Baculoviruses af Direct Kloning

Denne protokol bruges til at udføre transgene eksperimenter , når DNA eller genetisk materiale i en celle er ændret eller " rekombineret . " Denne metode ften bruges i produktionen af bio-insekticider . Ifølge de nuværende protokoller , indebærer generation af rekombinant Baculoviruses af Direct Kloning en vektor , der indeholder genet af interesse , som ofte er en plasmid-en nonchromosomal molekyle af DNA i stand til selv at duplikere , et fragment af proteinet DNA -polymerase og T4 DNA ligase , som hjælper med at overlapning af DNA- molekylet en reaktion buffer , at holde sig til pH eller surhedsgraden konstant ; phenol-kloroform-isoamyl alkohol , vand på 59 grader Fahrenheit , samt andre reagenser og laboratorieudstyr til elektroforese .

Udarbejdelse af Baculovirus Aktier

Denne protokol bruges til produktion og oplagring af baculovirus , for posterior brug i bioteknologiske eksperimenter . Udarbejdelsen af virusstammer kræver en kultur af armyworm celler på en TNM-FH medium , som tidligere beskrevet , inoculant af baculovirus , samt laboratorieudstyr , som spinner kultur kolber og en ryste inkubator sat til 80,6 grader Fahrenheit og 90 til 150 omdrejninger per minut .

Relaterede Sundhed Artikler