Hvad er RNA Amplification?
RNA-amplifikation er en proces der tager nogle f kopier af et afsnit af ribonukleinsyre (RNA) og skaber tusindvis af kopier, der er identisk i sammenstning. Stykker RNA er makromolekyler, der bestr af strenge af nukleotider, s amplifikation er en flere-trins proces, der involverer reproduktion af den njagtige sekvens af nukleotider fra et stykke RNA. RNA-amplifikation er nyttig i forskning, der involverer vira, hvis genetiske materiale kan lagres som hukommelsen RNA (mRNA) i stedet for DNA, undersgelse af genekspression i organismer, og oprettelse af proteiner fra transkriptionel RNA (tRNA). Til at amplificere RNA, er et gratis sekvens skabt og amplificeret, anvendes derefter som en template for at skabe RNA-kopier. Et DNA-formidler er ndvendig for RNA-amplifikation er, at RNA foregr normalt kun i en enkelt-strenget, uparrede form, s en DNA-template skal skabes for RNA transkriptaseenzym at fungere. RNA ikke kan transkriberes fra sig selv RNA-sekvens af interesse frst skal isoleres fra forurenende materiale fr RNA-amplifikation kan begynde. Nr dette er gjort, er det enzymet revers transkriptase tilsat til RNA-templaten. Revers transkriptase anvendes til at skabe et cellulrt DNA (cDNA) sekvens af basepar komplementre til den oprindelige mRNA. Denne frste streng af cDNA kan derefter anvendes til at skabe andre trde af cDNA, der kan anvendes i polymerasekdereaktionen, en fremgangsmde, der forstrker DNA-strenge ved hjlp af gentagne cyklusser af DNA-replikation og efterflgende adskillelse af de to strenge. CDNA'et indeholder sdvanligvis primere, eller enzymer p den ene ende af DNA-sekvensen, der tjener som signaler for nukleotidbindende, og sledes, at produktionen af mRNA-strenge der er identiske med den oprindelige sekvens. Adskillige fremgangsmder til RNA-amplifikation findes, men fremgangsmden , der giver den strste mngde mRNA, der er tro mod den originale kopi kaldes skabelonen skifte metode. Denne metode anvender revers transkriptase-enzym fra Moloney murin leukmivirus, som tilfjer en grunderregion til enden af den frste streng cDNA efter oprettelse af denne streng fra RNA-skabelonen. Denne primer region fjes til den anden streng af cDNA samt, hvorfra amplificerede RNA-kopier er lavet. Et andet enzym, der kaldes en promotor, kan vre bundet til primeren region p den anden streng af cDNA, der drastisk forger mngden af RNA-kopier, der fremstilles af denne cDNA-streng ved hjlp af transkription.Relaterede Sundhed Artikler