Buffer-løsninger og protokoller: En guide til laboratorier

Hvad er buffer-løsninger?

Buffers refererer til løsninger, der modstår ændringer i pH eller surhed, når små mængder af en syre eller et alkalisk stof tilføjes dem. Buffer-protokoller er tekniske procedurer, der bruges i kemiske og biologiske laboratorier til videnskabelig forskning. Protokoller for buffers inkluderer citrat-buffer-antigen-genvinding, fosfat-bufferet saltvand og polymerase-kæde-reaktion-buffer.

Citrat-buffer-antigen-genvinding

Natriumcitrat eller citronsyre bruges i denne protokol som buffers under laboratorie-tester for at detektere visse proteiner kaldet antigener. Teknikere forvarmer et vandbad, placerer en farve-skål, der indeholder natriumcitrat eller citrat, i badet, og venter, indtil temperaturen når 212°F (100°C). Senere sænker de objektglas med vævs-prøver i farve-skålen, inkubere i 40 minutter. Objektglasene skylles derefter med PBS-Tween-detergent. Til sidst inkuberes objektglasene med antigener i mindst en time ved stuetemperatur, ifølge Rocky Tuan i "Developmental Biology Protocols."

Fosfat-bufferet saltvand (PBS)

Fosfat-bufferet saltvand (PBS) er en buffer-løsning, der ofte bruges i biologisk forskning. PBS-protokollen består af at blande disodiumfosfat (Na2HPO4), natriumdihydrogenfosfat (NaH2PO4), natriumchlorid og destilleret vand. pH-værdien af denne løsning bør nå en værdi på 7,4, lidt over neutral.

Polymerase-kæde-reaktion

Polymerase-kæde-reaktion (PCR) buffer-protokol bruger de kemiske forbindelser kaliumchlorid (KCl), tris-hydroxymethyl-aminometan, almindeligt refereret som Tris, og magnesiumchlorid (MgCl2). Denne protokol bruges i analysen af enzymer, som f.eks. polymerase. PCR-buffer-løsninger er tilgængelige kommersielt i forskellige koncentrationer, ifølge Laboratory for Microbial Ecology of the University of Toledo.