Forståelse af Gram-farvning: Komponenter og deres rolle i medicinsk diagnostik

Gram-farvning

Gram-farvningen, som blev udviklet af en hollandsk mikrobiolog i 1884, er en medicinsk test, der bruges til at skelne mellem to forskellige lungetilstande. Testen ser på cellerne i lungerne og bestemmer, hvilken type bakterie der er til stede, baseret på reaktionerne til visse komponenter, der injiceres i vævet.

Komponenter

Viollet farvestof (Primær farvning)

Den første komponent, der tilføjes en Gram-farvning i laboratoriet, er den primære farvning. Denne farvning er typisk en type viollet farvestof, såsom krystal, methyl eller Gentian violet. Formålet med dette farvestof er at ændre farven på bakteriecellerne. Dog bruges denne komponent ikke alene. Efter at denne komponent er tilføjet cellerne, skal den anden komponent også tilføjes, før foreløbige observationer foretages. Uden den anden komponent er farvestoffet mindre sandsynligt at farve cellerne.

Jod

Samme tid, som farvestoffet tilføjes cellerne, tilføjer laboratorieteknikeren også jod til blandingen. Jodet arbejder sammen med viollet farvestof for at skabe et stærkere hold på cellerne, der beholder farven. I dette trin af testen vil alle celler opnå den lilla-brun farve af viollet-jod-blandingen. På dette tidspunkt er der lidt differentiering mellem en test, der er positiv versus en, der er negativ.

Ethylalkohol eller Aceton (Dekolorering)

Efter at cellerne er farvet med kombinationen af viollet farvestof og jod, tilføjes ethylalkohol, aceton eller en kombination af de to for at decolorisere cellerne. I celler, der er negative, opløser decoloriseringsløsningen det ydre fedtlag af cellerne. Da kun det ydre lag af alle celler absorberer farvestoffet, vaskes alle negative celler frit for farven med denne løsning. Dog beholder Gram-positive celler deres lilla-brun farve, fordi løsningen dehydraterer cellerne, lukker porerne, hvoregennem farven kan undslippe.

Modfarve (Counterstain)

Forskellige laboratorier bruger forskellige typer modfarve som den sidste komponent i en Gram-farvningstest. Nogle laboratorier bruger fuchsin, mens andre bruger safranin. Dog skaber fuchsin en mørkere, lettere synlig farve og foretrækkes ofte. Formålet med denne anden farve er at vende eventuelle negative celler til en rosa farve i stedet for den lilla-brun fra viollet farvestof og jod-kombinationen. Dette hjælper laboratorieteknikeren med at se forskellene klart mellem de to celletyper. Når laboratorieteknikeren administrerer modfarven, kan han skelne mellem de to celler, samt se størrelse og form klart.