Acid-fast farvning: En kritisk diagnostisk teknik for Mycobacterium

Acid-fast farvning er den eneste teknik, der kan karakterisere Mycobacterium, den forårsagende agent for tuberkulose og spedalskhed. I 17. og 18. århundrede blev Mycobacterium tuberculosis kaldt den "Hvide Pest" i Europa. I denne periode var en af fire dødsfald forårsaget af M. tuberculosis. Tuberkulose forbliver den førende dødsårsag i verden fra en enkelt infektionsagent; sygdommen inficerer 1,8 milliarder mennesker hvert år – en tredjedel af verdensbefolkningen.

Egenskaber

Acid-fast farvning er en differentiell farvning, der farver baseret på specifik cellulær sammensætning. En acid-fast farvning adskiller organismer med voksede cellevægge. Disse organismer afviser farve, og en gang farvet, modstår de afblegning med syre-alkohol – derfor navnet "acid fast". Deres cellevægge er lipidfyldte kapsler sammensat af mycolinsyre, hvilket gør dem vanskelige at karakterisere med standard mikrobiologiske teknikker.

Ziehl-Neelsen farvning

Den mest almindelige acid-fast farvning er Ziehl-Neelsen farvningen. Acid-faste bakterier farves røde med et farvestof kaldet karbolfuchsin. Dette kaldes den primære farvning, og den indeholder fenol, som tillader farvestoffet at træde ind i cellerne. Desuden bruges ofte varme i dette trin for at forbedre cellepenetrationen. Derefter skylles cellerne med syre-alkohol. Enhver celle, der er acid-fast, vil beholde farven, mens andre vil blive afbleget. Til sidst anvendes en modfarvning af methylenblå for at farve eventuelle andre celler. Til sidst fremstår de lyserøde acid-faste celler klart mod en blå baggrund.

Kinyoun farvning

Kinyoun farvning er en modificeret procedure til farvning af acid-faste organismer. Her bruges en højere koncentration af karbolfuchsin, så varme ikke kræves i det primære trin. Modfarvningen i denne procedure er enten methylenblå eller brillantgrøn. Hvis brillantgrøn bruges, vil de lyserøde acid-faste bacterier fremstå klart mod en grøn baggrund.

Acid-faste mikroorganismer

Acid-faste organismer omfatter Mycobacteria, Nocardia, Cryptosporidium parvum, Isospora, Cyclospora cyster, Legionella micdadei og sædcellehoveder.

Historie

Den acid-faste farvning blev udviklet af bakteriologen Franz Ziehl (1859–1926) og patologen Friedrich Neelsen (1854–1894), begge tyske. Neelsen døde kun 44 år gammel; hans arbejde med farlige bakterier blev til sidst fatal.