Salmonella-identifikation: Serologiske teknikker og klassifikation

Introduktion

Salmonella er en slægt af bakterier; visse underarter af denne slægt er almindelige skyldige i fødeforgiftning. Salmonella-klassifikation er kompleks, ikke mindst fordi forskellige nomenklatursystemer har været i brug i fortiden. Generelt er salmonella dog typisk klassificeret i en af to forskellige arter, som yderligere underinddeles efter underart og serotype (også kaldet serovar). Serologiske teknikker spiller en nøglerolle i klassificering af salmonella.

Identifikation

Antistoffer er Y-formede molekyler produceret af immunsystemet, der er designet til at hæfte sig til meget specifikke mål. Et givet antistof vil typisk binde til kun ét antigen eller mål-molekyl. Videnskabsmænd kan bruge denne egenskab til at skelne mellem forskellige stamme af bakterier i samme slægt eller art. Metoderne, der bruges til at serotypere bakterier, kaldes serologiske teknikker; der findes flere forskellige metoder i almindelig brug.

Slide-agglutination

Slide-agglutination er den simpleste test. En dråbe bakterier suspenderet i saltvandsløsning placeres på to separate steder på et objektglas, og antistofferne for et specifikt antigen tilføjes kun til én af de to steder. Hvis antigenet for antistoffet er til stede i prøven, vil antistofferne binde til det; da hvert antistof er Y-formet og kan binde to antigener samtidig, bliver bakterierne og antistofferne krydslinket og danner klumper, der normalt er store nok til at være synlige for det blotte øje. Hvis antigenet er fraværende, eller kun til stede i meget små mængder, vil ingen synlig ændring finde sted.

Rør-agglutination

Rør-agglutination ligner slide-agglutination, bortset fra at proceduren udføres i et prøverør (eller i flere prøverør) for at bestemme, om antigenet er til stede. Antistoffer, der er specifikke for bakteriers flageller (de lange piskelignende haler, som bakterierne bruger til at fremdrive sig), vil udvise et karakteristisk agglutinationsmønster, hvor bakterierne kun løst klumper sammen og kan rystes fra hinanden.

ELISA

Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA'er) udgør en kraftfuld teknik til hurtigt at identificere bakterier fra en ukendt prøve via deres antigener. Den dobbelte antistof-sandwich-analyse er den mest almindelige teknik for salmonella. Først fastgøres antistoffer for et kendt antigen til væggene i velterne i en mikroplade (en plade med flere små velter eller beholdere til forskellige prøver). Det ukendte antigen tilføjes, og velterne vaskes derefter for at fjerne eventuelle ubundne eller frit flydende antigen. Hvis antigenet matchede antistoffet, vil det forblive, når velterne vaskes. Derefter tilføjes flere antistoffer; disse antistoffer er dog forskellige, i så fald at de har et enzym (et protein, der kan katalysere en reaktion) linket til dem. Hvis antigenet var til stede i prøven og forbliver fast til antistofferne på velternes vægge, vil disse enzym-linkede antistoffer hæfte sig til antigenet. Til sidst tilføjes et specielt kemisk stof til velterne. Hvis de enzym-linkede antistoffer stadig er der, vil enzymet ændre testkemikaliet, så det skifter farve. Så hvis testkemikaliets farve skifter, var det matchende antigen til stede i prøven.

Typer

Der findes mere end 2.000 forskellige serotyper af salmonella. Bakterierne grupperes i forskellige serotyper ved hjælp af deres O-antigener og H-antigener. O-antigenet er et molekyle, der udgør en del af bakteriens cellevæg, mens H-antigenet er en del af flagellen eller halen. To af de bedst kendte serotyper er typhi og typhimurium; den første er ansvarlig for typhusfeber, mens den sidste forårsager fødeforgiftning. Serotypning af salmonella er en måde at fortælle de medicinske skadelige undertyper af denne slægt fra hinanden.