Gram-farvningsprocedure: Guide til identificering af bakterier

Princippet bag Gram-farvning

Gram-farvning viser tilstedeværelse af bakterier og adskiller dem i Gram-positive (purpurne) og Gram-negative (røde/rosa). Resultater hjælper lægen med diagnose og behandling. Korrekt præparation af objektglaset er afgørende.

Udstyr

• Glasobjektglas til mikroskop
• Latexhandsker
• Vand (kran eller destilleret)
• Bakterieprøve
• Steril bomulds-pind
• Ur med sekundviser
• Krystallviolett farvestoft
• Jod
• Dekoloriseringsløsning (Aceton/Ethanol)
• Safranin farvestoft
• Mikroskop (valgfrit)

Fremgangsmåde

1. Prøvepålagning: Dråbe bakteriekultur eller mundprøve (bomulds-pind) på objektglas. Smær ud i cirkulær bevægelse (< 2 cm diameter). Lad tørre. Brug altid handsker.
2. Krystallviolett: Dæk prøven, vent 60 sek., skyl med vand, lad tørre.
3. Jod: Hæld jod på, vent 60 sek., skyl, lad tørre.
4. Dekoloriseringsløsning: Drøjtilstrækkeligt til at dække, vent 5 sek., skyl, lad tørre.
5. Safranin: Dæk, vent 90–120 sek., skyl, lad tørre.
6. Afslutning: Ryst vand af, lad tørre helt.
7. Mikroskopisk undersøgelse: Notér farver og former. Til officiel diagnostik skal en erfaren laborant vurdere prøven.