Protokoller til Hoechst Farvning

Hoechst pletter er fluorescerende farvestoffer, der anvendes til mærkning af DNA og RNA gennem fluorescens mikroskopi og flowcytometri teknikker. Hoechst 33258 og Hoechst 33342 er den mest anvendte af disse pletter. De har evnen til at binde til DNA-molekyler , der forårsager de kerner og mitokondrier til fluorescerende under ultraviolet lys . Protokoller til Hoechst farvning er almindelig praksis i bioteknologiske og genetik laboratorier og omfatter cellefarvning teknikker, der anvender både Hoechst 33258 og Hoechst 33342 . Hoechst 33342 HSC Farvning og Stem Cell oprensningsprotokol

Denne protokol bruges til at farve celler fra mus knoglemarven. Teknikere forberede knoglemarvsprøve med HBSS + saltopløsning HEPES puffer og føtalt kalveserum. De spin løsningen og tilføje til en forvarmet DMEM medium. Hoechst pletten derefter tilsættes. Opløsningen anbringes i en 98,6 grader Fahrenheit vandbad i præcis 90 minutter rapporterer Department of Immunology på University of Pittsburgh. DNA-segmenter vises fluorescerende i et cytometer .
Hoechst 33342 DNA Farvning

løbet af denne protokol , teknikere suspenderede Hoechst 33342 plet i destilleret vand , tilsættes 2 procent føtalt kalveserum til celleprøven , at holde pH-værdien på 7,2 ved hjælp af en pufferopløsning . Cellerne inkuberes derefter ved 98,6 grader F for en time, og analyseres straks med et stykke udstyr kaldet cytometer .

Stained DNA er så synlige og fluorescerende, ifølge University of Michigan Health System.


DNA Detection Brug af DNA -bindende Fluorokrom Hoechst 33258

anvendte protokoller et stykke udstyr kaldet spektrofotometer at analysere DNA-og RNA -segmenter . Teknikere bruger Hoechst 33258 brugsopløsning og kalv thymus DNA-prøver . De gør også en adskilt løsning ved hjælp af DNA-prøven og et kemisk stof kaldet ethidiumbromid . Senere De sammenligner cellefarvning resultater i begge medier , ved hjælp af et spektrofotometer , i henhold til gældende protokoller i Cytometry .
Hoteltilbud