RBC & WBC-tælling med hemocytometer: Hvorfor fordyning betyder noget og hvordan man gør det rigtigt

Præcis blodcelle-tælling ved hjælp af et hemocytometer kræver korrekt fordyning – aldrig brug koncentreret blod. Koncentrerede prøver forårsager celle-overlapp, klumpning og tællingsfejl. Standard fordyningsforhold sikrer, at celler er jævnt fordelt i tælkekammert.

Rød blodcelle (RBC) tælling

Fordyning

  • Standard fordyning: 1:200 (1 del blod + 199 dele fordyningsvæske)
  • Fordyningsvæske: Hayems løsning, Gowers løsning, eller isotonic saltløsning med fastgørelsesmiddel
  • Bland grundigt efter fordyning

Indlæsning & tælling

  1. Placer dækkglas på hemocytometer (Neubauer eller forbedret Neubauer kammer).
  2. Anvend fordynet prøve ved kant af dækkglas – kapillareffekt fylder kammer.
  3. Lad celler falde i 1–2 minutter.
  4. Under mikroskop (10× objektiv), tæl RBC'er i de 5 store hjørne-firkanter (hver 1 mm², underdelt i 16 små firkanter).
  5. Anvend tælleregel: inkluder celler der rører top/venstre linjer; ekskluder dem der rører bund/højre linjer.

Beregning

RBC-tal (celler/µL) = (Total celler talt i 5 firkanter) × 10.000

Herledning: fordyningsfaktor 200 × kammerdybde 0,1 mm × areal 1 mm² × 5 firkanter = 10.000

Hvid blodcelle (WBC) tælling

Fordyning

  • Standard fordyning: 1:20 (1 del blod + 19 dele fordyningsvæske)
  • Fordyningsvæske: Turks løsning (eddikesyre + gentianviol) lyser RBC'er og farver WBC-kerner

Indlæsning & tælling

  1. Indlæs fordynet prøve i hemocytometer som ovenfor.
  2. Tæl WBC'er i de 4 store hjørne-firkanter (1 mm² hver).
  3. Differentier celletyper hvis manuelt differential udføres (neutrofiler, lymphocyter, monocyter, eosinofiler, basofiler).

Beregning

WBC-tal (celler/µL) = (Total celler talt i 4 firkanter) × 50

Herledning: fordyningsfaktor 20 × kammerdybde 0,1 mm × areal 1 mm² × 4 firkanter = 50

Kritiske kvalitetspunkter

  • Brug rent, tørt hemocytometer og dækkglas – ingen forurening eller ridser.
  • Sikrer korrekt blandning før indlæsning; undgå bobler.
  • Tæl mindst 100 celler per celletype for statistisk pålidelighed.
  • Følg producentens instruktioner og laboratoriets SOPs.
  • Automatiserede analyseapparater har i stor grad erstattet manuelle tællinger, men hemocytometri forbliver referencemetoden til validering.

Blødning