Sådan Block Buffere

Block puffere anvendes til at stabilisere overtrukne proteiner i immunkemiske assays og ifølge immunokemisystemerbrugervejledningen Technologies, de reducerer støj i resultaterne af de enkelte assays øge følsomheden af assayet , øge effektiviteten og holdbarheden af de overtrukne plader og øge reproducerbarhed. Bloker buffere hæmmer specifik binding efter proteiner og antistoffer er bundet sammen og er blevet absorberet på det overtrukne assaypladen under en ELISA ( et enzym - koblet immunosorbent assay) . Fordi ELISAs kan bygges på forskellige måder , er der flere valg af blokering buffere for at opfylde en tekniker individuelle behov . Ting du skal
antistofprøven
Protein prøve
assaypladen
Blokeringsbuffer
Laboratory bægre
Pipette myHotelVideo.com: Vis mere Instruktioner
1

Vælg din blokerende buffer , afhængigt af typen af ELISA du skal udføre . Valg af buffer omfatter: generelle blokkere ( pattedyrsprotein stillads ) for sandwich og antigen -down ELISAs ; BB2 neptune blokering (non- pattedyrsprotein stillads ) for menneske og pattedyrarter ELISAs ; BB3 synblocks (små , syntetiske molekylære stilladser ) for høj styrke blokerende ELISAs ; og BB4 Phosph -fri (små , syntetiske , fosfor -fri molekylære stilladser ) for høj , ikke-specifik enzym - mærkede konjugat bindende ELISAs . Den BB4 buffer blocker er specielt nyttigt i assays , der anvender alkalisk fosfatase, kemisk behandlet eller glas modholdsplader og MicroFluidics , som rapporteret af immunokemisystemer Technologies, en virksomhed, der leverer alle relevante analyse -udstyr.
2

Coat assaypladen med din antigen ( protein) eller antistoffet ved at hælde løsning på tværs af pladerne.
3

Aspirer (fjern ) overfladebehandling løsning ved at vippe pladen, så den overskydende kasseres i en separat beholder.
4

pipette 300 til 400 mikroliter af den blokerende buffer i hver brønd på assaypladen ved hjælp af en pipette.
5.

inkuberes løsninger for omkring tre timer, eller natten over ved omgivende temperaturer ( 4 grader Celsius) . Ifølge Cell Technology selskab, vil den rigtige blok buffer bevare dine reagenser , som kan være værdifulde, fordi de er dyre og kan være en mangelvare .
6

Vask overskydende protein for at fjerne overskydende beløb som dette kan reducere påvisningen af dit mål-antigen , som rapporteret af Pierce Net.
7.

på dette tidspunkt , at reaktionen er færdig, og du bør have en færdig plade indeholdende den rigtige mængde af antistof bundet til antigen , hvilket vil give konsistente resultater og reducere plade -til- plade variation i store, sammenlignende analyser.
8

i tilfælde af en microarray , bruge en avanceret blokerende opløsning såsom Array det er Block det Buffer, der er designet specielt til at inaktivere eventuelle reaktive grupper , der fortsat efter en "print" af substrater på dias , der indeholder super- epoxy , super- amin og super- aldehyd samtidig bevare skarpheden af resulterende signal , forebygge fluorescens og lette støjreduktion. Dette reagens har en holdbarhed på et år, hvis korrekt opbevaret , er ekstremt rent og leveres som en klar -til-brug -koncentrat.
Hoteltilbud

Relaterede Sundhed Artikler