Dinitrosalicylsyre (DNSA): Anvendelser & protokol til sukkeranalyse

Dinitrosalicylsyre (D.N.S.A. eller 3:5-dinitrosalicylsyre) er et reagens, der bruges til at bestemme sukkerindhold, især glucose. DNS-teknikken anvendes for at estimere sukker til stede i blodet, i cerebrospinal væske og i andre menneskelige kropsvæsker. Dette bruges også effektivt i håndteringen af krav for diabetiske klinikker i hospitalets laboratorier, da kun 10 minutter er nok for processen at finde sted, og reagenserne er stabile, billige og let forberedelige. Mængden af blodsukker i blodet har metaboliske implikationer og bruges til at bestemme tilstedeværelsen af blodsukker-relaterede forstyrrelser som hyperglykæmi. En god måde at vurdere blodsukkerniveauet på er gennem brugen af dinitrosalicylsyre.

Ting, du skal bruge

• 3:5 dinitrosalicylsyre (17,5 g)
• 60°C varmt destilleret vand (1000 ml)
• Filterpapir
• Trægte
• 1 procent standard glucose-løsning i mæt benzoesyre
• Stoppet beholder (større end 100 ml)
• Fenol (13,8 g)
• Natrium bisulfit (13,8 g)
• 10 procent natriumhydroxid-løsning (350 ml)
• Kalium-natrium-tartrat (510 ml)
• Vand med normal temperatur (180 ml)
• Pipetter (0,1 eller 0,2 ml)
• Kogende vandbad
• Laboratorieudstyr til opvarmning
• Laboratorieudstyr til måling af små faste stoffer og væsker

Instruktioner

1. Placer 17,5 g 3:5-dinitrosalicylsyre i 1.000 ml varmt destilleret vand (ca. 60°C) og rør for at opløse. Filtrer løsningen gennem filterpapir og trægte og opbevar ved 25°C. Dette henvises senere til som Lees Reagens A.
2. Forbered Glukose-D.N.S.A.-løsning ved at tilføje 1 procent glukose i mæt benzoesyre-løsning til 100 ml 1,75 procent Lees Reagens A og bland grundigt ved at vende den stoppede beholder gentagne gange. Opbevar ved 25°C.
3. Opløs 13,8 g fenol og 13,8 g natriumbisulfit i 350 ml 10 procent natriumhydroxid. Tilføj denne løsning til 510 g kalium-natrium-tartrat i 180 ml vand. Filtrer den endelige løsning gennem filterpapir. Opbevar ved stuetemperatur. Dette vil tjene som Lees Reagens B.
4. Få blod fra en kapillærstik ved hjælp af almindelige 0,1 eller 0,2 ml pipetter. 0,1 ml pipetten er mere kvalitativt præcis end den sidste ved måling af 0,1 ml blod. Dog er det modsatte sandt ved måling af 0,2 ml blod.
5. Lever blodet i pipetten ind i glukose-D.N.S.A.-løsningen i et prøverør. Bland det i proportionen 1:20. Træk pipetten op og ned, indtil du får en jævn fordeling af blandingen mellem prøverøret og pipetten. Lad pipetten i løsningen og fjern faldstoffet fra pipetten, efter det har sat sig en eller to timer senere.
6. Tilføj et lige volumen af Lees Reagens B til det klare overnatanten. Derefter opvarm i et kogende vandbad i mindst tre minutter.
7. Sammenlign den røde farve udviklet med en produceret af en standard glukose-løsning.