OptiPrep: Iodixanol Gradient-løsninger til Biomedicinsk Forskning | Axis-Shield

OptiPrep er det kommercielle navn for en steril endotoxin-løsning af 60 procent iodixanol, en kemisk oprindeligt udviklet som et røntgenkontrastmiddel. Endotoxiner er strukturelle molekyler af bakterier, som kan genkjendes af kroppens immunsystem. Det norske laboratorium Axis-Shield producerer denne løsning, som bredt bruges i biomedicinsk forskning, herunder celler-membran-trafik af stoffer, samt virus- og bakterie-genetik.

Natriumklorid-protokol

Den generelle OptiPrep natriumklorid-gradient-forberedelse bruger natriumklorid som det osmotiske balancemiddel, som holder løsningens koncentration balanceret. Teknikere laver en 50-procent iodixanol-arbejdsløsning ved at fordunne OptiPrep med et standard-fordunende middel. De tilføjer 0,85 procent natriumklorid eller 0,25 Molar sukrose og Tris-hydroklorid ved pH 7,4 til gradient-forberedelsen. Ifølge Axis-Shield har makromolekyler traditionelt været renuddannet i gradienter med høje koncentrationer af sukrose, glycerin, alkalimetall-salter eller tungmetall-salter. OptiPrep tilbyder alternativet at isolere dem under mindre koncentrerede løsninger.

Protokol til HPV-studie

HPV, eller humant papillomavirus, angriber slimhinder, forårsager genitalvorter og ulcera, der kan udvikle sig til tumorer. OptiPrep-protokollen relaterer til studiet af virusets genetiske materiale, og inkluderer gradient-forberedelsen af OptiPrep. Teknikere forbereder en 46-procent gradient OptiPrep-forberedelse ved at blande 70 ml OptiPrep, 10 ml fosfat-bufferet saltvand (PBS), 12,5 ml natriumklorid, 45 mikroliter calciumklorid, 25 mikroliter magnesiumklorid og 210 mikroliter kaliumklorid. Forberedelsen skal beskyttes mod lys og opbevares ved stuetemperatur i op til to måneder.

Isolering af Dendritiske Celler Protokol

Dendritiske celler er en del af pattedyrs immunsystem, ofte til stede i væv tæt på huden og i det indre indlag af nogle organer, såsom mave og tarme. Dendritiske-celler-protokollen bruger OptiPrep-løsningen i processen med at isolere disse celler. Teknikere blander OptiPrep i en løsning af otte procent natriumklorid, Tricine-buffer ved 7,4 pH og ethylendiamintetraædinsyre (EDTA). Gradient-forberedelsen kan opbevares op til 39,2 grader Fahrenheit i en måned.