Forståelse af kindcellefarver: Det du ser i mikroskopet

Ubehandlede (ufarvede) kindceller

I lysmikroskopi vises ufarvede bukkal mukøse celler gennemsigtige, farveløse og næsten usynlige på grund af lavt refraktionsindeks-forskelle til det omgivende medium. Karnen kan svagt ses som et tættere område.

Almindelige farvestoffer og resulterende farver

FarvestofMekanismeKernens farveCytooplasmens farveTypisk anvendelse
Methylenblå (0,5–1 %, 1–2 min)Basisk farvestof; binder sure komponenter (DNA, RNA)MørkeblåLyseblå / blågrønHurtig klasserumsforberedelse; bakterier, gær
Hematoxylin & Eosin (H&E)Hematoxylin (basisk) → nukleinsyrer; Eosin (sur) → proteinerBlå / lillaRosa / orange-rødHistologisk guldstandard; vævsarkitektur
Wright-GiemsaRomanowsky-type; eosin + methylenblå/azure BLilla / mørkeblåVariabel: blå, rosa, lillaBlodudsmitninger; bloddannende celler
Papanicolaou (Pap)Multifarvestof (hematoxylin, OG-6, EA-50/65)Blå-sortCyanofile (blågrøn) / acidofile (rosa/orange)Cervikale/bukkale cytologi; kernedetaljer
Feulgen-reaktionSpecifikt for DNA (hydrolyse + Schiff-reagens)MagentaUfarvet (medmindre modfarvet)DNA-kvantificering; cellecyklus
Acridinorange (fluorenscens)Interkalere DNA (grøn) & RNA (rød-orange)GrønRød-orangeLevneddygtighed, apoptose, mikrobiologisk detektion
DAPI / Hoechst (fluorenscens)DNA-specifikke minor groove-bindereBlå (UV-ekscitation)UfarvetKernemorfologi, kromosometælling

Faktorer, der påvirker farveudseendet

  • Farvestofkoncentration, pH, tid, temperatur
  • Celletykkelse, fixeringsmetode (lufttørt vs. alkoholfixeret)
  • Mikroskopoptik (lysmikroskopi, fasekontrast, fluorenscens)
  • Kamera/hvidbalance-indstillinger (digital billedbehandling)

Typisk klasserumsforberedelse (Methylenblå)

  1. Skrab let bukkal mukosa med en tandstik eller spatel.
  2. Smør på et objektglas, lad tørre i luften.
  3. Fixér med 95 % ethanol i 30 sekunder (valgfrit, men forbedrer morfologien).
  4. Farv i 1–2 minutter, skyl, tør, læg dækkglas på.
  5. Observer: blå kerner, blege blå cytooplasmer, cellemembran-konturer.

Konklusion

Kindceller er farveløse, indtil de farves. Den observerede farve afhænger udelukkende af farvemetoden. Methylenblå (blå kern/cytooplasm) og H&E (blå kern, rosa cytooplasm) er mest almindelige i uddannelse og histologi.

Farveterapi