HPLC Teknik

HPLC står for high-performance væskekromatografi , en standard kvalitativ og kvantitativ analyse , der anvendes i analytiske laboratorier. HPLC er pålidelig og gentagelig , hvilket gør det den foretrukne teknik til at adskille , identificere og kvantificere molekyler fra komplekse blandinger af både kemiske og biologiske komponenter. Fire komponenter

HPLC teknik indeholder fire vigtige komponenter. Først bestemmer systemet opløsningsmiddel levering ( den mobile fase ) , der bærer prøverne gennem kolonnen, er vigtigt, da polariteten påvirker systemets evne til at adskille molekyler. Søjlechromatografi er normalt en lodret glaskolonne , der er fyldt med en adsorbens . For det andet adsorbant (også kendt som den stationære fase , da det ikke bevæger sig ) er almindeligt silicagel eller aluminiumoxid. For det tredje prøveintroduktion systemet består af en slags indsprøjtningsåbning at indføre prøven, der skal analyseres i systemet levering opløsningsmiddel. Den fjerde komponent er detektoren.

Detektorer

type detektor anvendes, afhænger af typen af ​​prøven teknikere kører, og hvad molekyler de forsøger at isolere . De kriterier teknikeren bruger, når du vælger en detektor omfatter selektivitet , signal -til- støj-forhold , detektionsgrænse , lineært område , tidskonstant , afdrift og celle volumen. Almindeligt anvendte detektorer omfatter ultraviolet synligt detektorer, massespektrometre , brydningsindekser , fluorescens detektorer eller fordampende lysspredning enheder.
Procedure

Tænd for detektoren , pumperne ( som anvendes til at tilføje tryk for at flytte den mobile fase gennem den stationære fase ) , og den computer, der registrerer og udskrive kromatogrammet . Vælg de relevante programmer for at indsamle de ønskede data. Prøven sprøjtes ind indsprøjtningsåbningen . Hold øje med trykket. Hver type kolonne har et maksimalt tryk ; ikke overstiger dette eller adskillelse vil ikke forekomme. Print ud kromatogrammet og analysere resultaterne . Ved slutningen af ​​hver kørsel , er det vigtigt at skylle ud injektionsporten at forhindre oprustning, som kan skabe blokeringer.

Typer

Hydrophilic interaktions-kromatografi bruger en bundet polær stationær fase og en ikke-polær , med vand blandbart mobile fase for at separere molekyler baseret på polaritet. Denne teknik har evnen til at separere sure, basiske og neutrale prøver i en enkelt chromatogram.Normal kromatografi anvender en polær stationær fase og en ikke-polær , vandig mobil fase at adskille strukturelle isomerer ( molekyler med den samme molekylformel , der har atomer bundet sammen i forskellige måder ) . Revers fase -kromatografi er den mest udbredte form for HPLC. Det anvender en polær stationær fase og en vandig noget polær mobil fase . Denne fremgangsmåde er almindeligt anvendt af farmaceutiske virksomheder at kvalificere stoffer før release.Size grafi adskiller molekyler baseret på deres størrelse og kan også bestemme strukturen af ​​proteins.Ion ionbytterchromatografi er baseret på tiltrækning mellem ionerne i det opløste stof og ladede steder bundet på den stationære fase.
Bruger

HPLC er nyttigt i en række forskellige applikationer. Det kan bruges til at analysere farmaceutiske materialer , som er nyttige i forskning i nye lægemidler samt rensning af eksisterende. Det er også anvendt til at analysere biologiske væsker , pesticider, sprængstoffer og andre materialer. Selv om det er en populær teknik for biomedicinsk , biokemisk og farmaceutisk forskning , er det også anvendes i kosmetik , fødevarer, miljø-og energiindustrien.
Hoteltilbud