Cell Frysning Protocol

Bevarelse celler gennem nedfrysning er afgørende for forskning , veterinærmedicin og husdyravl , fordi det tillader celler skal opbevares i lange perioder . Indefrysningen valgte metode skal dog reducere eller forebygge skader på cellen. Kryopræservering middel og metode kan afhænge af celletypen . Forberedelse

Celler bør indefryses , når de er sunde og aktivt voksende med en 90 procent levedygtighed. Der bør udvises forsigtighed på håndtering og høj hastighed centrifugering og kraftig pipettering eller sugning bør undgås for at bevare levedygtigheden og forhindre cellulære skader .
Cryoprotection

cryoprotection agent er bruges som erstatning for intracellulær vand . Midlet forhindrer iskrystaller og dehydrering forekommer i cellerne. Steriliseret glycerol og steriliseret dimethylsulfoxide bruges ofte i en koncentration på 5 procent til 15 procent (volumen per volumen ) fortyndet i enten føtalt kalveserum eller vækst medie, afhængigt af celletype.
Frysning og skal køles langsomt Opbevaring

Celler i indefrysning blanding. Hvis en programmerbar fryser ikke er tilgængelig, kan kryoglas pakkes ind i væv eller anbringes i styrofoam , hvilket kan forsinke indfrysningsprocessen . Cellerne bør opbevares ved minus 80 grader Celsius i 24 timer og derefter overført til flydende nitrogen til langtidsopbevaring .

Optøning

Frosne celler skal optøs hurtigt. Et vandbad ved 37 grader Celsius kan anvendes. Der bør udvises forsigtighed med celler , der er lagret i flydende nitrogen , men som flydende kvælstof kan indtaste hætteglassene og kan eksplodere på optøning. Kuldeblandingen bør fortyndes i vækstmedier . Cellelevedygtigheden bør vurderes med farvestoffet trypanblå og cellerne dyrket som normalt.
Hoteltilbud