Procedure for ELISA -test

ELISA er en forkortelse for en retsmedicinsk test procedure kaldet enzymbundet immunoabsorbentassay . Den er baseret på den høje specificitet af antistoffer mod et specifikt antigen . Forskere bruger kemisk modificerede antistoffer forankret til en prøvebrønd og farve - mærkede antigener til at bestemme tilstedeværelsen og koncentrationen af ​​en lang række forbindelser, lægemidler og patogener. Prøver kan udtages fra blod, urin, spyt og andre kilder. Antistoffer og antigener

ELISA normalt bruger flere kemisk manipuleret komponenter til at generere en test for et givet antigen . Det første trin i fremstilling af en ELISA-test er at udvikle et antistof til det stof, der bliver testet. Antistoffet oprenses derefter , ændres, og forankrede eller immobiliseret på en prøvebrønd , der vil blive anvendt til at udføre testen. Stoffet bliver testet for vil have en fluorescerende tag tilføjet

Industrien bruger en standard rektangulær plade med " prøvebrønde " - . Som små skåle eller reagensglas støbt i at udføre flere eksperimenter. Plate dimensioner er 127.8mm ved 85,5 mm og standardiseret , så de passer analytiske instrumenter fra en række forskellige producenter. Typiske plader har mellem seks og 96 prøvebrønde , med nyere modeller har flere hundrede eller mere .
Test

Når en løsning , der indeholder forbindelsen du tester om og farve - mærkede forbindelser sættes i prøven godt , de konkurrerer om binding på det immobiliserede antistof. Jo mere native forbindelse, vil mindre farve -mærket forbindelse være i stand til at binde til det immobiliserede antistof . Prøven godt skylles af ubundet forbindelse ( indfødte og farvet) . Prøven er godt evalueret for hvor meget farve - mærkede stof tilbage, som regel med et spektrofotometer.
Resultaterne

Mindre farve betyder en højere koncentration af native forbindelse. Forskere vil nedsætte en "standard -kurve " i en række brønde , som de vil tilføje en række kendte koncentrationer af den indfødte forbindelse. ELISA-testen er udført på alle brønde og mængden af ​​farve forskel på span af standarder gør det muligt for forskerne at sammenligne og bestemme ukendte koncentrationer i prøverne , de evaluerer. Er

ELISA test, der anvendes til at teste for en lang række ting fra HIV-virus til narkotika, giftstoffer og andre kemikalier. De har den fordel, at high-throughput for et stort antal prøver, når de kører mange prøver de kan være meget omkostningseffektive.

ELISA-testen kan også anvendes til påvisning af antistoffer i en testopløsning . I dette tilfælde antigen ( portion af forbindelsen af interesse, der binder til antistoffet ) immobiliseres på prøven godt, og antistoffer til prøven har en farve etiketten .