Sådan Block Buffere

Block puffere anvendes til at stabilisere overtrukne proteiner i immunkemiske assays og ifølge immunokemisystemerbrugervejledningen Technologies, de reducerer støj i resultaterne af de enkelte assays øge følsomheden af ​​assayet , øge effektiviteten og holdbarheden af ​​de overtrukne plader og øge reproducerbarhed. Bloker buffere hæmmer specifik binding efter proteiner og antistoffer er bundet sammen og er blevet absorberet på det overtrukne assaypladen under en ELISA ( et enzym - koblet immunosorbent assay) . Fordi ELISAs kan bygges på forskellige måder , er der flere valg af blokering buffere for at opfylde en tekniker individuelle behov . Ting du skal
antistofprøven
Protein prøve
assaypladen
Blokeringsbuffer
Laboratory bægre
Pipette myHotelVideo.com: Vis mere Instruktioner
1

Vælg din blokerende buffer , afhængigt af typen af ​​ELISA du skal udføre . Valg af buffer omfatter: generelle blokkere ( pattedyrsprotein stillads ) for sandwich og antigen -down ELISAs; BB2 neptune blokering (non- pattedyrsprotein stillads ) for menneske og pattedyrarter ELISAs; BB3 synblocks (små , ​​syntetiske molekylære stilladser ) for høj styrke blokerende ELISAs; og BB4 Phosph -fri (små , ​​syntetiske , fosfor -fri molekylære stilladser ) for høj , ikke-specifik enzym - mærkede konjugat bindende ELISAs . Den BB4 buffer blocker er specielt nyttigt i assays , der anvender alkalisk fosfatase, kemisk behandlet eller glas modholdsplader og MicroFluidics , som rapporteret af immunokemisystemer Technologies, en virksomhed, der leverer alle relevante analyse -udstyr.
2

Coat assaypladen med din antigen ( protein) eller antistoffet ved at hælde løsning på tværs af pladerne.
3

Aspirer (fjern ) overfladebehandling løsning ved at vippe pladen, så den overskydende kasseres i en separat beholder.
4

pipette 300 til 400 mikroliter af den blokerende buffer i hver brønd på assaypladen ved hjælp af en pipette.
5.

inkuberes løsninger for omkring tre timer, eller natten over ved omgivende temperaturer ( 4 grader Celsius) . Ifølge Cell Technology selskab, vil den rigtige blok buffer bevare dine reagenser , som kan være værdifulde, fordi de er dyre og kan være en mangelvare .
6

Vask overskydende protein for at fjerne overskydende beløb som dette kan reducere påvisningen af ​​dit mål-antigen , som rapporteret af Pierce Net.
7.

på dette tidspunkt , at reaktionen er færdig, og du bør have en færdig plade indeholdende den rigtige mængde af antistof bundet til antigen , hvilket vil give konsistente resultater og reducere plade -til- plade variation i store, sammenlignende analyser.
8

i tilfælde af en microarray , bruge en avanceret blokerende opløsning såsom Array det er Block det Buffer, der er designet specielt til at inaktivere eventuelle reaktive grupper , der fortsat efter en "print" af substrater på dias , der indeholder super- epoxy , super- amin og super- aldehyd samtidig bevare skarpheden af ​​resulterende signal , forebygge fluorescens og lette støjreduktion. Dette reagens har en holdbarhed på et år, hvis korrekt opbevaret , er ekstremt rent og leveres som en klar -til-brug -koncentrat.
Hoteltilbud