Western Blot -analyse
Hvorvidt naturligt eller kunstigt udtrykt proteiner næsten aldrig fundet alene. Western blot-analyse eller immunblotting er anvendt til at isolere og analysere et protein af interesse fra en blanding . ProcedureAnvendelsen af spændingen trækker proteiner gennem en polymer gel på forskellige satser .
Western blotting består af tre hovedtrin: elektroforese , hvor proteinblandingen adskilt i lokaliserede bånd baseret på størrelse og ladning; overføre , hvor proteinerne er flyttet fra en polymer gel på et papir -substrat; og udvikling, hvor det protein bånd af interesse mærkes og analyseres .
Applications i Research
En Western blot kan hjælpe med at bestemme celletype.
Western blotting benyttes flittigt i biomedicinsk forskning. Fordi proteiner er vigtige indikatorer for celle funktion , kan en Western blot give oplysninger om cellulær metabolisme og afstamning . Rekombinant protein udtryk kan verificeres og undersøgt ved hjælp af en Western blot .
Anvendelser inden for medicin
En Western blot kan hjælpe ved diagnosticering af nogle prionsygdomme.
Western blots er arbejdskrævende og tidskrævende, og deres kliniske anvendelser er derfor begrænset. Men de er vigtige i at diagnosticere visse sygdomme, herunder borreliose , hiv og prion sygdomme som Creutzfeldt- Jakobs sygdom.
Historie
Fordi polymergelen er ikke en god substrat for immunkemi , effektiv overførsel var et centralt forhånd.
første demonstration af protein adskillelse i en polymergel blev offentliggjort i 1977. Den hurtige og effektiv overførsel af proteinet til papir ved elektroblotting - kritisk for metoden ' s accept - blev demonstreret i 1979
Navngivning
Som i 2010 . , var der ingen østlige blot.
Udtrykket “ Western blot ” er en del af en noget komplicerede videnskabsfolk ' ordspil . Den analog fremgangsmåde til karakterisering af DNA kaldes en Southern blot efter dens opfinder, George Southern . RNA version er almindeligt kendt som en Northern blot og måske uundgåeligt , proteinimmunoblotting er Western blotting .
Hoteltilbud
General Healthcare Industry