Western blots protokoller

en western blotting er en type protein skamplet , der bruges i det medicinske område, biologi laboratorier og andre videnskabelige discipliner på daglig basis. Western blots , når de udføres ordentligt , er en måde at studere protein udtryk i vævsprøver . Fordi der kan være forskelle i parametrene for hver prøve , der er en række protokoller , der skal følges for at opnå nøjagtige resultater. Udførelse Vasker

Efter inkubering membranerne i antistof -løsninger til den passende mængde af tid, som varierer afhængigt af, hvilken antistof løsning bliver brugt, Encor Bioteknologi , at membranen skal gennemgå tre stuetemperatur vasker i TBS . TBS er en løsning, der har en specifik makeup og pH til vask. Membranen skal vaskes i mellem hver indførelsen af ​​et nyt antistof løsning .
Forberedelse Farvningsblanding

Ifølge WesternBlotting.org , forberedelse farvningen blanding umiddelbart forud for anvendelsen det til vil opnå de bedste resultater . Der er flere typer af farvningsopløsninger , hvoraf nogle kan købes og hvoraf nogle skal blandes i laboratoriet. Chemiluminescence farvning , ifølge Encor Bioteknologi, giver de fleste oplysninger pr pletten , men er også den dyreste og kræver et mørkekammer for at udvikle . Peberrod peroxidasefarvning og Alkaline Phosphatase Blotting er andre muligheder for farvning. Uanset hvilken metode der anvendes, fremstilling af blandingen lige før brug er afgørende.
Ved hjælp af en buffer

Efter anvendelse af den valgte farvningsopløsningen , brug af en buffer er nøglen. I chemiluminescens farvning anvende en acetat over toppen af ​​farvningsopløsningen er protokollen ifølge WesternBlotting.org . Peberrodsperoxidase Farvning kræver anvendelse af en ammoniumacetatpuffer for at opnå den brune farvning produkt. Bufferen bruges i Alkaline Phosphatase Blotting , som skal skabe en lilla farvning produkt , er mere kompliceret at lave og kan købes allerede gjort .
Hoteltilbud