Sådan Gør LB-agarplader

Agar er et gelatinøst stof , fremstillet af rødalger og anvendes til en lang række formål . En af dens almindelige anvendelser er et dyrkningsmedium for bakterier. LB-agar er næringsagar , der er blevet kombineret med lysogeni bouillon (LB) . Det er en almindeligt holdt fejlslutning at LB står for Luria - Bertani . Men dens opfinder , Giuseppe Bertani , anfører i sin papir " lysogeni på midten af ​​det tyvende århundrede: P1, P2, og andre eksperimentelle systemer ," at initialerne altid var beregnet til at stå for lysogeni bouillon, ikke hans navn og hans coresearcher , Salvador Luria . LB-agar er alsidig og forholdsvis enkel at lave . Du skal bruge
For 1 L af det færdige medie : Hej Skala og vejer papirer eller bakker
1 -L måleglas
1 L destilleret eller deioniseret vand
2 -L Erlenmeyerkolbe
10 g trypton
5 g gærekstrakt
5 g noniodized bordsalt
15 g agar
Alufolie hoteltilbud Vandtæt grydelapper
Autoklave eller trykkoger
Steril petriskåle myHotelVideo.com: Vis Flere Instruktioner

1. Brug en Erlenmeyerkolbe , der holder det dobbelte af volumen af mediet , du har til hensigt at forberede .

Placer trypton , gærekstrakt og salt i Erlenmeyer-kolben .
2 Vær meget opmærksom på det pres af autoklaven eller trykkoger ved sterilisering .

Tilsæt destilleret eller deioniseret vand og sir eller ryst til at opløse de fleste af de tørre ingredienser .
3

Tilsæt agar og fortsætte med at ryste eller røre . Alle agar ikke vil opløse , men det er vigtigt , at du får det meste af det i opløsning . Undgå store klumper af uopløst agar bosætte sig i bunden af ​​din kolbe.
4

Forsegl åbningen af ​​kolben med folie.
5.

Kolben anbringes i en autoklave - sikker beholder.
6

Hæld ca 1 cm vand i beholderen.
7.

Sæt beholderen og kolben i autoklaven . Indstil autoklaven en flydende cyklus , og der steriliseres i mindst 20 minutter. Hvis du bruger en trykkoger til sterilisering , gå til trin 8. . Ellers gå til trin 10. .
8 p Hvis du bruger en trykkoger , placere en lille mængde vand i komfuret , og kolben anbringes i vandet. Forsøg ikke at sterilisere mere end 250 ml ad gangen ved hjælp af denne metode.
9.

Bring trykkoger til omkring 20 psi og sterilisere i ca 30 minutter .
10

kolben fjernes fra autoklaven eller trykkoger , der tager sig da kolben bliver helt varm.
11

Swirl kolben forsigtigt når sterilisation er afsluttet. Dette vil distribuere agaren mere jævnt i hele din løsning.
12

Sæt kolben på en passende overflade, og lad det køle lidt . Hvis du har forberedt 1 L eller flere af medium , giver det en blid hvirvel hver 10 til 20 minutter . Du vil være i stand til at fortælle , at mediet er afkølet tilstrækkeligt , når du kan holde på bagsiden af ​​fingrene mod kolben i cirka 2 sekunder uden at det er ubehageligt varmt at røre ved. Vent ca 15 til 20 minutter , før du forsøger dette.
13

Placer en petriskål på en flad overflade . Løft forsigtigt låget i en vinkel , så de fleste af skålen er tilbage overdækket . Løft ikke låget lige fra pladen .
14

Hæld mediet fra kolben til petriskål indtil fadet er omkring halvt fyldt .
15

Umiddelbart erstatte låget , flyt pladen til side og gå videre til den næste , indtil alle ønskede plader er blevet fyldt . Pladerne vil fuldføre deres størkning i cirka 30 minutter .
16

Placer petriskåle i den sterile pose, som de ankom eller anden egnet , steril beholder , hvis du ikke pode dem med det samme . Forsegl beholderen for at bevare fugt. Mærk pladerne , hvis det ønskes . Hvis du opbevarer pladerne , skal de opbevares ved en temperatur på omkring 39 til 40 grader F.