| | Sundhed | sygdom |

Hvad er den fluorescerende in situ hybridiseringsteknik?

Fluorescerende in situ hybridisering, ogs kendt som fluorescens in situ hybridisering, er mere almindeligt omtales som FISH. Det er en teknik, der involverer anvendelse af en kort streng af DNA mrket med et fluorescerende farvestof til at detektere genetiske abnormiteter. FISH giver efterforskerne at visualisere kromosomer, dele af kromosomer eller specifikke gener hurtigt og prcist. Dette er ofte brugt til at bestemme prognosen for og behandling af visse sygdomme, isr cancere. FISH anvendes til at bestemme, om kromosomer har abnormiteter. Dette kan omfatte kromosomale deletioner, omlejringer, eller translokationer, hvor to kromosomer har skiftet segmenter. FISH giver ogs efterforskerne at visualisere specifikke gener. Det kan afgre, om et bestemt gen er til stede, nr det er placeret p kromosomerne, og hvis flere kopier er til stede. Dette kaldes genkortlgning. den genetiske sammenstning af en person er indeholdt i deres DNA, som er beliggende i kernerne i alle deres celler. DNA har to strenge, der er komplementre til hinanden. Med andre ord har de molekyler kaldet basepar, der svarer til hinanden njagtigt. Gener er DNA-segmenter, der har en srlig sekvens af basepar og er placeret p bestemte omrder af kromosomer. Gener er nedarvet og bestemme, hvordan celler kan fungere, men de kan ogs blive muteret, hvis sekvensen af DNA-basepar ndres. Det fluorescerende in situ-hybridisering teknik udnytter den gratis karakter af DNA-strenge. Efterforskere frst oprette en sonde. Dette er et kort, enkelt streng af DNA, der er komplementr til den genetiske sekvens investigator sger. Sonden er derefter mrket eller bundet til et fluorescerende farvestof. Celler fra sygt vv, ssom en tumorbiopsi, sdvanligvis udgr prven, som skal undersges ved FISH. Prven opvarmes at denaturere DNA'et i kerner af cellerne. Dette betyder, at de dobbelte strenge af DNA i prveceller g i oplsning til dannelse af enkeltstrenge. En specifik FISH probe hybridiseres derefter med prven. Med andre ord, den probe s enkelt streng indfres og sikringer med den gratis enkelt streng i de denaturerede prvecellerne. hjlp af et srligt fluorescerende mikroskop, forskeren ser p prven. Hvis det specifikke gen eller kromosomet er til stede i prven celler, vil den virke som en fluorescerende lys p en mrkere baggrund. Forskere kan nemt se, om genet er til stede eller ej, og hvis den er, hvor mange kopier af genet er i hver celle. Hvis forskeren er p udkig efter placeringen af et gen, kan han eller hun se, hvor p kromosomet er. En regelmssig lysmikroskop kan ikke bruges med fisk, fordi det fluorescerende farvestof afgiver et meget lavt niveau af lys. Anvendelse af DNA-hybridisering med prober blev frst udfrt i 1960'erne, men blev proberne mrket med radioaktive stoffer snarere end fluorescerende dem. Det havde flere problemer. Radioaktive stoffer er iboende ustabile, farligt og krver srlige protokoller til bortskaffelse. Det tager ogs lang tid at mle den radioaktive signal udsendes af den hybridiserede probe. Den fluorescerende in situ hybridisering teknik overvinder de fleste af disse hindringer. Hvis efterforskerne ved, hvad gen, de sger, FISH er hurtig og prcis p at finde det. Fisk kan ogs udfres, selvom cellerne ikke deler sig aktivt, og det giver mere specifikke oplysninger om abnormiteter i kromosomer. Mere konventionelle teknikker, ssom karotyping, blot fortlle undersgere antallet og strrelsen af kromosomer i en celle. Fluorescerende in situ-hybridisering behver ulemper. Da nglen til FISH er kende basepar sekvens og / eller placeringen af et gen, kan det ikke bruges som en generel screening. Det er ogs dyrere end andre, mindre specifikke teknikker og er muligvis ikke tilgngelig i alle laboratorier eller hospitaler. Fordele og ulemper ved fluorescerende in situ-hybridisering kan bedst beskrives med et godt eksempel. FISH anvendes rutinemssigt i brystkrft diagnose for at bestemme, om en patient har flere kopier af et gen kaldet HER2. Dette tyder sdvanligvis en mere aggressiv form for brystkrft, og at patienten br modtage visse former for medicin som en del af deres behandling. FISH kan anvendes til dette, da basepar sekvens og kromosomale placering af HER2 genet er kendt. I modstning hertil kan FISH ikke anvendes til at bestemme, hvilke ukendt gen eller gener har forrsaget brystcancer, eller til at screene for brystkrft generelt.

Relaterede Sundhed Artikler