Urea-hydrolyse-test: Forståelse af bakteriel identifikation

Introduktion

Der findes mange slags bakterier. Nogle er skadelige, nogle gavnlige, og nogle hverken eller. Evnen til at skelne mellem disse bakterier er afgørende for sygdomsforebyggelse og -behandling. Ofte kan bakterier identificeres ved deres evne til at reagere med kemiske forbindelser. Urea er en sådan forbindelse, og urea-hydrolyse-testen bruges til at skelne grupper af bakterier fra hinanden.

Reaktionen

Når en bakterie indeholder enzymet urease, kan den bryde urea ned. Produkterne af denne hydrolyse-reaktion er ammoniak og kuldioxid. For sig selv ville dette ikke være mærkbart. Når reaktionen sker i tilstedeværelse af pH-indikatorer, producerer det dog en mærkbar farve. Ammoniak forårsager et basisk (alkalisk) pH at udvikle sig, og pH-indikatoren vil derfor skifte farve. Den mest almindelige indikator til denne test er phenolrød, som bliver rosa ved udsættelse for ammoniak.

Udførelse af testen

Testen kan udføres i væskebaseret eller fast medium. Ved en væskebaseret test opløses den undersøgte bakterie i en væske, der indeholder urea og phenolrød. Ved fast test dyrkes bakterien på et fast, agar-baseret medium, der indeholder urea og phenolrød. I begge tilfælde er fremkomsten af rosa farve et positivt resultat. Det sker normalt inden for en dag eller to. Det betyder, at bakterien indeholder urease.

Anvendelse

Mange bakterier fundet i tarmen indeholder urease. Dog kan få bryde urea ned hurtigt. Det er derfor muligt at indsnævre identiteten af en bakterie baseret på urea-hydrolyse. De mest almindelig testede grupper, der er positive, er Proteus, Morganella og Providencia.

Begrænsninger

Selvom urea-hydrolyse-testen giver værdifuld information, er den ikke definitiv. Der findes flere bakterier, der kan bryde urea ned, og yderligere tests er nødvendige for at skelne dem. Sådanne tests giver information om organismens morfologi og struktur, iltkrav og dens evne til at reagere med hydrogenperoxid, sukrose og citrat. Al denne information taget i samlet udgang er normalt nok til at klassificere og navngive en ukendt bakterie.

Specielle omstændigheder

Den ovenstående test gælder for identifikation af en bakterie, der kan dyrkes uden for menneskekroppen. I nogle situationer er det dog ikke muligt at få en bakterieprøve, eller det kræver en invasiv procedure. Dette sker, når en læge mistænker, at en patient har Helicobacter pylori, den organisme, der er ansvarlig for mange ulcuslidelser. I denne situation kan Helicobacter stadig identificeres ved dens evne til at bryde urea ned. Patientens gives en kapsler med mærket urea at sluge. Da kuldioxid er et produkt af urea-opløsning, vil patienten udånde mærket kuldioxid, hvis Helicobacter pylori er til stede.