Påviser ELISA tilstedeværelsen af ​​HIV?

Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kan bruges til at påvise tilstedeværelsen af ​​HIV. Specifikt er det almindeligt anvendt til at påvise antistoffer mod HIV-1 og HIV-2 i humant serum eller plasma.

Her er en oversigt over, hvordan ELISA bruges til HIV-test:

Antigencoating:Mikrotiterplader er coatet med antigener afledt af HIV-proteiner, såsom envelope glycoprotein (gp120, gp41) eller andre virale komponenter.

Prøvetilsætning:Fortyndede testserum- eller plasmaprøver tilsættes til brøndene på den antigenbelagte plade.

Antistof-antigen-reaktion:Hvis HIV-antistoffer er til stede i prøven, vil de binde sig til de tilsvarende antigener, der er coatet på pladen. Dette danner et antigen-antistofkompleks.

Vasketrin:Ubundne stoffer, såsom overskydende prøvekomponenter, vaskes væk.

Enzymbundet sekundært antistof:Et enzymbundet sekundært antistof, der er specifikt for de indfangede HIV-antistoffer, tilføjes. Dette antistof er konjugeret til et enzym, såsom peberrodsperoxidase (HRP).

Substrattilsætning:Et substrat specifikt for enzymet tilsættes. I nærvær af HRP forekommer en kolorimetrisk eller fluorescerende reaktion.

Farveudvikling:Efter en specifik inkubationsperiode omdannes substratet til et farvet eller fluorescerende produkt, der kan påvises og kvantificeres ved hjælp af en ELISA-læser.

Fortolkning af resultater:Den optiske densitet (OD) eller fluorescensintensiteten måles for at vurdere mængden af ​​indfangede HIV-antistoffer i prøven. Et positivt resultat indikerer tilstedeværelsen af ​​HIV-antistoffer, hvilket tyder på potentiel HIV-infektion. En cutoff-værdi er defineret for at skelne mellem positive og negative resultater.

ELISA er meget udbredt til HIV-screening og -diagnose, da det giver en relativt enkel, præcis og følsom metode til påvisning af HIV-antistoffer. Det skal dog bemærkes, at ELISA-resultater nogle gange kan kræve yderligere bekræftelse med yderligere tests, såsom Western blot eller viral load test, for at sikre nøjagtigheden af ​​diagnosen.