Alkaline Lysis Teori

alkalisk lysis protokol består af en række opløsninger tilsat en bakteriel pellet indeholdende plasmid -DNA. Den øgede alkalinitet af løsningen får cellerne til at briste. Denne metode til ekstraktion beskytter plasmid-DNA samtidig med at ødelægge det genomiske DNA og denaturering cellulære proteiner til at yde videnskabsmand med en forholdsvis ren prøve .
SDS og NaOH

Alkaline beskriver to vigtige kemikalier, der anvendes til at forårsage lysis af de enkelte celler . Natriumdodecyl ( lauryl ) sulfat ( SDS) er et vaskemiddel , der destabiliseret cellen ved at skabe huller i cellemembranen . Natriumhydroxid (NaOH ) tilføjer i at nedbryde cellevæggen forårsager cellen til at gå i opløsning og frigive sit genetiske materiale i opløsning .
Hvorfor Plasmid-DNA overlever

en yderligere egenskab NaOH i alkalisk lysis- protokollen er at forstyrre hydrogenbinding mellem DNA- basepar. Dette denaturerer genomisk DNA og plasmid DNA til enkeltstrenge . Tilsætningen af ​​kaliumacetat til opløsningen neutraliserer alkalinitet og den lille plasmid-DNA er i stand til at re- art og opløses i opløsningen. Genomisk DNA er for stor til at re- natur hele sin længde. Det og de ​​denaturerede proteiner udfældes under centrifugering forlader plasmid-DNA i opløsning .
Hoteltilbud