Sådan testes Koncentration af amylaseenzymer

Tænd spektrofotometer og sæt den til en bølgelængde på 620 nm . Lad instrumentet varme op i mindst 10 minutter, så svaret vil være stabil under eksperimentet.
2

Set ud seks reagensglas , mærke dem 1-6 og placere dem i en test rør rack. Arranger de løsninger af stivelse , de- ioniseret vand og KI /jodopløsning på bænken toppen
3

Fyld rør 1 med 3 ml deioniseret vand ved hjælp af en pipette. ; dette vil tjene som blind. Fyld rør 2-6 med 3,0 ml , 2,9 ml , 2,7 ml , 2,4 ml og 2,1 ml afioniseret vand hhv . Tilføj stivelsesopløsning til hvert af rørene 2-6 i følgende rækkefølge : rør 2 får 0 ml , rør 3 får 0,1 ml , rør 4 får 0,3 ml , rør 5 får 0,6 ml og rør 6 får 0,9 ml
< . br > 4

Tilsæt en dråbe KI /jod -opløsning til hver af de seks rør. Bland omhyggeligt hvert rør grundigt, før du optager deres absorbans i spektrofotometer.
5.

Fyld kuvetten med blindprøven , rengøre ydersiden af kuvetten og placere den i det tomme hul i spektrofotometer. Juster absorbans på nul. Alle andre løsninger vil give en positiv absorbans.
6

Fyld prøvekuvetten med hver af de fem andre løsninger i sving . Tør kuvetten før hver måling. Notér absorbansen for hver rør. Skyl kuvetten med den nye løsning mindst én gang før påfyldning til testen.
7.

Lav en graf, der plotter absorbansaflæsninger mod koncentration stivelse. Dette er standard kurve, der giver dig mulighed for at bestemme koncentrationen af ​​en løsning, der har en given absorbans læsning.
Bestemmelse Amylase Koncentration
8

Rengør alle reagensglassene fra den første del af testen. Behold den tomme rør til senere brug .
9.

Anskaf en blodprøve fra patienten. Anbring prøven i en centrifuge og adskille de røde blodlegemer fra blodplasma.
10

Fyld et reagensglas med 9 ml deioniseret vand og 1 ml af blodplasma. Dette er en 1:10 fortynding af plasma. Bland rør grundigt og pipette 1 ml af opløsningen i en anden reagensglas. Mærk de to rør med deres indhold.
11

Forbered dig på at udføre en tidsindstillet test. Har et stopur handy og oprette syv reagensglas med kuvetter i reagensglas rack. Du vil tage aflæsninger hvert andet minut , når testen starter . Optag det nøjagtige tidspunkt og absorbansaflæsning for hver af de syv datapunkter. Fyld hver af de syv reagensglas med 2 ml deioniseret vand.
12

Tilføj 9 ml stivelsesopløsning til reagensglas , der har 1 ml 1:10 fortynding af plasma. Så snart du begynder at tilføje stivelsesopløsningen , start stopur. Bland reagensglasset godt og pipette 1 ml af stivelse /plasma opløsning ind i den første af de syv reagensglas. Optag tiden. Tilsæt 1 dråbe KI /jod løsning på reagensglasset og blandes.
13

Overførsel til kuvetten , skal du tørre ydersiden og registrere absorbans. Gentag processen med de resterende seks reagensglas med to minutters mellemrum. Ved afslutningen af ​​den tidsindstillede test bør du have aflæsninger for den faktiske tid og absorbans for tidsforbruget i 0, 2, 4, 6, 8, 10 og 12 minutter.
14

Brug standard kurve for at finde den koncentration af stivelse til hver af de syv datapunkter. Disse punkter vil være faldende med tiden. Den amylase fordøjer stivelsen og over tid forbruger al stivelsen tilgængelig .
15

Graf datapunkterne for den tidsindstillede test som en koncentration stivelse mod tiden. Hældningen af ​​denne kurve angiver mængden af ​​amylase i plasma prøven.
Hoteltilbud