Hvad er formålet med syrefaste farvning

? I mikrobiologi, farvning en bakterie betyder at farve det med et farvestof for at se det mere tydeligt under et mikroskop. Hvis bakterierne ikke er plettet , de synes klar og farveløs , og det er svært at se deres figurer . Bortset fra deres figurer, hvor let en bakterie er farvet af visse pletter - hvis overhovedet - ofte giver et fingerpeg til at identificere bakterier. Syrefaste farvning er en type farvning , der er effektiv på nogle bakterier , der ikke kan farves ved andre metoder. Differential Farvning

For at plette en normal bakterie , er flydende bejdse påføres slide for omkring et minut , og derefter skylles af med vand . Differential farvning bruger forskellige pletter for to forskellige bakterier i samme dias. For eksempel i en gramfarvning , objektglasset farves først med krystalviolet og iod , derefter affarvet med alkohol. Celler, der er Gram -positive bevarer mørkviolette farve den første plet , selv efter at alkoholen anvendes , mens Gram- negative celler vender tilbage til farveløs. Derefter en anden plet er anvendt, i en kontrasterende farve som pink, og Gram- negative celler vil vende lyserød , mens Gram- positive celler vil holde deres oprindelige pletten.
Historie

Nogle bakterier har tykke cellevægge består af lipider , byggestenene i fedt , hvilket gør dem voksagtig og næsten vandtæt. Dette betyder en normal plet kan ikke trænge ind i cellen. I 1880'erne var forskerne forsøger at studere Mycobacterium tuberculosis , bakterier, der forårsager tuberkulose . Imidlertid ville det ikke have en regelmæssig gramfarvning , medmindre det blev nedsænket i pletten i op til 24 timer. Paul Ehrlich , der senere udviklede det første lægemiddel effektivt mod syfilis , udviklet syrefaste farvning at tvinge pletten ind i bakterierne. Ehrlich metode tog kun 45 minutter, mens den moderne syrefaste farvning teknik tager kun 5 minutter.
Metode

For at tvinge farvestof , som regel Carbol - fuchsin , i bakterier , skal det opvarmes over et bægerglas med kogende vand i 5 minutter , mens slæden konstant oversvømmet med plet og ikke lov at tørre ud. En alternativ metode til opvarmning er at bruge modificeret Kinyoun carbolfuchsin plet , som ikke behøver at være opvarmet , men det er bydende nødvendigt, at glideren ikke tørrer ud i løbet af 5 minutter af nedsænkning i pletten. Uanset primær farvning metode anvendes, slide affarves med syre alkohol - ikke regelmæssig alkohol - og farvet med en sekundær kontrastfarve i en anden farve for at vise de andre bakterier, der kan være til stede. Bakterier , hvis primære pletter tilbage efter affarvning med syre alkohol kaldes syrefaste .
Organisme forholdsregel

Mycobacterium tuberculosis er ekstremt farlig , og kun undersøges på hospitaler og kliniske faciliteter, der har separate værelser eller specielt designet transfer hætter at forhindre forurening. Det er ulovligt at bruge det i en akademisk laboratorium . I stedet er Mycobacterium smegmatis bruges, men det har en meget tyndere cellevægge end M. tuberculosis , så det er lettere at uheld over- affarve slide og fjerne den primære pletten.
Proceduremæssig forholdsregel hoteltilbud KAYAK

Carbol - fuchsin dampe er giftige , så når at varme dem , skal du bruge en emhætte for at indeholde dampe og lufte dem udenfor . Også for at undgå faren for opvarmning glider helt, Kinyoun carbolfuchsin kan anvendes i stedet , som har en højere koncentration af phenol og fuchsin , to aktive ingredienser i pletten , og behøver ikke at blive opvarmet til at trænge bakterier.