Vævskultur: Teknikker og anvendelser i plante- og dyrebiologi

Vævskultur er en del af naturvidenskab, hvor vævsfragmenter af højere planter og dyr dyrkes uden for en levende organisme. Med vævskulturteknikker multipliceres væv eller celler i kunstigt indførte forhold, der involverer et fast substrat såsom glas eller cellofan (dvs. plastikfolie) og et komplekst næringmiddel til opretholdelse af celler. Vævskultur er også mulig i flydende suspension. Vævskulturteknikker finder anvendelse i studiet af cellebiologi samt kræftforskning og virusstudier.

Typer af celler dyrket i kultur

Vævskultur er en generel term, der bruges til at betegne både organkultur og cellekultur. Cellerkulturer bruger levende celler fjernet fra en organisme og placeret i et medium til vævskultur. To typer laminar flow hoods (dvs. vertikale og horisontale hoods) bruges, hvis funktion er at fjerne partikler fra luften, rettet mod et dyrket medium. Cellerne propagere i tilstedeværelsen af kuldioxid, fordi den flydende suspension behandler fra tid til tid med natriumbikarbonat eller karbonsyre, så dens pH forbliver den samme. Et elektronmikroskop bruges til at visualisere cellerne.

Bevarelse

Flydende kvælstof bruges til bevarelse af dyrkede celler. Lejlighedsvist bruges kvælstofdampe, men aldrig fryse kvælstof. Fryse kvælstof indeholder flydende kvælstofkrystaller, der kan være skadelige for sundheden af dyrkede celler, fordi det ændrer koncentrationen af elektrolytter, dehydrering og pH. For at holde flydende eller fordampet kvælstof fra at nå frysepunktet, tages en række forebyggende foranstaltninger. For eksempel bruges et kryoprotektivt middel (dvs. glycerol eller dimethylsulfoxid) til at beskytte mod de skadelige effekter af fryse. Temperaturen på cellerne i et kulturmiddel opretholdes tæt på smeltepunktet for kvælstof, fordi under -130 grader C væksten af kvælstofkrystaller forsinkes.

Sikkerhedsovervejelser

Sikkerhedsforanstaltninger er en integreret del af vævskulturteknikker, fordi alle kulturer er en latent kilde til virus og andre skadelige mikroorganismer. Undlad at spise, drikke eller ryge på laboratoriet, fordi farlige bakterier kan komme ind i din krop, hvilket kan betyde stor uheld for dine indre organer. Rengør dine hænder grundigt efter eksperimenter og før du forlader laboratoriet. Gulve skal sterilisere med desinfektionsmidler. Brug laminar flow hoods, når du eksperimenterer med farlige stoffer. Det vil forhindre mikroorganismer i at slippe ud i levende rum.