Paraffinfiksering Protocol

Forskere regel nødt til at størkne biologiske prøver til sektion dem. Dette gør det lettere for forskerne at tilføje farvestoffer , antistoffer og prober til den biologiske prøve . Det reducerer også overlejring af forskellige cellelag . Forskere bruger paraffin som en hård matrice til skæring , idet paraffin ikke blandes med vand . Paraffin er en type af carbonhydrid. De biologiske prøver indeholder vand, så forskerne skal dehydrere prøverne ved hjælp af mere og mere koncentrerede ethanol bade. Xylen

Forskere fjernes ethanolen ved hjælp xylen. Så de bruger smeltet paraffin for at fjerne xylen. For lysmikroskopi , de paraffinsnit er normalt fem um tyk . Paraffin er ikke hårdt nok til tyndere skiver. Forskere rehydrere væv ved hjælp af xylen , derefter ethanol. Så skylles den biologiske prøve med destilleret vand for at undgå forurening.
Fastsættelse

paraffinindlejrede væv fastsættes normalt ved hjælp neutral bufferet formalin, som er den kommercielle version af formaldehyd. Dette omfatter paraformaldehyd og methanol , hvilket forhindrer formaldehyd fra omdannes til myresyre. Tynde skiver væv har brug for 48 timer fiksering ved stuetemperatur for optimal histologi, som er studiet af mikroskopiske anatomi . Ellers vil vævet hærde og blive skørt . Inden forarbejdningen er vævet som regel gemt i 70 procent ethanol ved en temperatur på 4 grader celsius.

Paraffin Processors

Forskere bruger ofte paraffin processorer til at sende vævet gennem bade, som efterhånden dehydrere materialet før varm paraffin kan komme ind gennem væv. Forskere kører processoren natten over. Processoren kun opvarmer væv til et bestemt tidsrum afhængigt af det væv, for at gøre det ikke bliver hårdt og sprødt . Processoren bruger et vakuum , der fremskynder gennemtrængning af paraffin og fjerner luftbobler. Når forarbejdet, væv opbevares i kassetter ved stuetemperatur.
Wax Melting

paraffin smelter i en time før tilsætning af vævet. Hele kassetten er placeret i en 65 grader Celsius paraffinbad i 15 minutter. En kold aluminium køleplade afkøler paraffin i 20 minutter. Når voks revner eller væv ikke er justeret korrekt , idet den videnskabsmand smelter paraffinen og gentager processen .
Skæring

Når sektionering væv , får videnskabsmand vandbad til 35 til 37 grader Celsius. Vandet er frisk og deioniseret . Blokkene er anbragt med forsiden nedad på en is blok eller køleplade i 10 minutter. En vinge skærer blokken i sektioner. To problemer, der kan opstå, er fattige ribboning og fragmentering prøver. Når prøver fragment , vandet er for varmt. Hvorvidt blokken ikke farvebånd godt , bør du sætte den tilbage på isblok og fast op voks , før du starter igen.
Hoteltilbud