N terminal sekventering protokol

Edman-nedbrydning - en velkendt fremgangsmåde til at identificere den N- terminale aminosyre i et protein - kræver spaltning af aminosyren , efterfulgt af identifikation ved hjælp af kromatografi eller elektroforese. Automatiserede processer accelerere N- terminal sekventering. Fakta

Proteiner produceret i de enkelte celler fungerer som hormoner, enzymer og andre vigtige regulatorer . Genetisk mutation resulterer i en unormal protein kan have alvorlige sundhedsmæssige konsekvenser.
Proces

N-terminale aminosyre spaltes ved behandling med en af flere reagenser , så hydrolyseret til dannelse af en særskilt aminosyre. Tyndtlagskromatografi, HPLC eller elektroforese bestemmer størrelsen af aminosyren , og sammenligner den med en kendt størrelse standard. Den nye N-terminale ende af det resterende protein kan ligeledes spaltes til identifikation.

Automation

Applied Biosystems ledet udviklingen af automatisere Edman nedbrydning, som binder et oprenset protein til en membran og behandler det med phenylisothiocyanat . Den frie aminosyre er automatisk sprøjtes ind i en HPLC- system til identifikation .

Relaterede Sundhed Artikler