Genetiske protokoller

Genomisk DNA indeholder en plan for celler til at organisere sig i levende organismer. DNA indeholder fire gentagne kvælstofholdige baser kaldes adenin, guanin , cytosin og thymin . Forskere har succes bestemmes hele basesekvensen genomet for mange komplekse organismer , herunder mennesker. Der er mange vigtige grunde til at sekvens et genom . Medicinsk genetik er bekymret med opdagelsen af genetiske abnormiteter forårsager sygdomme som diabetes , Alzheimers og kræft. Evolutionær genetikere sammenligne genomer fra beslægtede arter at udvikle præcise taksonomi . Grundlæggende genetiske protokoller i forskningen er det samme, uanset formålet med forskningen. Isolering af DNA fra celler

Genetisk forskning kræver udvinding af en ren DNA-prøve fra cellerne. En grundlæggende protokol begynder med at opløse og fjerne beskyttende plantecellevægge eller animalske cellemembraner med et enzym, der kaldes lysozym. Ikke-genetiske cellekomponenter i form af bundfald fjernes ved hurtig centrifugering med en centrifuge , mens DNA forbliver i opløsning . DNA udfældes derefter i nærværelse af natriumacetat salt med ethanol. Endelige centrifugering bundfald og pellets rent genetisk materiale til forskningsformål.
Polymerase Chain Reaction

Genetisk forskning kræver tilstrækkelige kopier af bestemte DNA-regioner . Polymerase Chain Reaction , eller PCR er en fremgangsmåde til eksponentielt producere kopier af DNA. Protokollen kræver oprenset DNA , Taq-polymerase , baser kaldet deoxynukleotider og små DNA-strenge til prime det udpegede område . Reaktionsblandingen anbringes i en thermocycler , et instrument, der kan hurtige temperaturændringer . Opvarmning af blandingen til 95 grader Celsius adskiller dobbeltstrenget DNA og derefter afkølet til 48 grader, så primere kan sidde eller annealer til matchende baser. Temperaturen steg til 72 grader, når Taq-polymerase samler deoxynukleotider , kaldte lokalnummer , ind i en ny kopi af DNA'et.
Genetic DNA-sekventering
Sequencing data vises som farvede bands betegner DNA-baser .

Automatiseret sekventering anvendes til at bestemme nøjagtige basesekvens og sammenligne normalt med unormal DNA. Protokollen tilføjer fluorescensmærkede dideoxynukleotider eller ddNTP'er , normale PCR- reaktioner, som tilfældigt stopper udvidelse af DNA-fragmenter. Produkterne er DNA-fragmenter forskellige af en enkelt base. Hver base type har en anden farve. De endelige produkter er indlæst på en automatiseret sequencer , et instrument til at adskille fragmenter efter størrelse på en polymer ved hjælp af elektrisk strøm. Når fragmenterne nå polymer endpoint, et digitalt kamera registrerer grundfarven og sender data til computeren til analyse.
Gentype-og DNA-fingeraftryk
DNA fingeraftryk bruges til at identificere menneskelige tilbage.

Genotypebestemmelse er en metode , der sammenligner små segmenter af genomet fra en organisme til en anden. Målet er at detektere små forskelle i PCR-fragment størrelse som følge af normale eller utilsigtede baseændringer i DNA. Protokollen design begynder med grundlæggende PCR ved hjælp af en fluorescensmærket primer til påvisning af automatiserede sequencere . Mærkede produkter er adskilt af størrelse og indspillet af digitalt kamera til en computer til analyse. Protokoller til genotypebestemmelse er designet til retsmedicinsk identifikation, DNA-fingeraftryk og faderskab eller identifikation af genetiske abnormaliteter , der resulterer i sygdom .
Hoteltilbud

Relaterede Sundhed Artikler