Mikroskopisk blodcelle-analyse: En omfattende guide

En blodoptælling kræver mere end bare at tælle antallet af røde celler, hvide celler og blodplader – det involverer også identifikation af de individuelle hvide celler og observation af morfologien af de røde celler og blodplader. Selvom den faktiske optælling kan udføres på et elektronisk optællingsinstrument, udføres identifikation og morfologi ved at placere en dråbe blod på et glas mikroskopisk glas og lave et udstrig. Udstriget tørres og farves, ved brug af Wrights farvestoffer, og undersøges under et mikroskop.

Det du har brug for

• Mikroskop
• Mikroskop-skåle
• Spritten alkohol eller sæbe
• Sterile blodlancetter eller en nål
• 1 farveskål med Wrights farvestoffer
• 1 farveskål med destilleret vand
• Papirhåndklæde
• Immersion olie
• Referencebog

Instruktioner

1. Rengør enden af din pegefinger med spritten alkohol eller sæbe og vand. Lav en lille puncture i spidsen af pegefingeren ved brug af enten en steril blodlancet, hvis tilgængelig, eller en steril nål. Placer en lille dråbe blod i en ende af et glas mikroskopisk glas. Træk kanten af et andet glas op mod bloddråben i en 30 til 40 graders vinkel og skub bloddråben ned langs længden af det oprindelige glas for at lave et tyndt udstrig eller "film." Lad blodudstriget tørre.

2. Sænk glaset med det tørrede blodudstrig i farveskålen med Wrights farvestoffer i 15 sekunder. Ryst eventuel overskydende farve af og overfør glasset til farveskålen med destilleret vand i 30 sekunder. Skyl glasset under løbende vand for at fjerne overskydende farve. Tørk bunden og kanterne af glasset på et papirhåndklæde og lad tørre i luften.

3. Placer en dråbe immersion olie på det tørrede, farvede blodudstrig. Sæt glasset på mikroskopets scene og sikre det mellem klipperne for at holde det på plads under undersøgelse. Tænd for mikroskopets lampe og justér både kondensoren (op – lysere og mindre kontrast eller ned – mørkere og mere kontrast) og iris-diaphragmaet (åbn videre for mere lys eller luk ned for mindre lys). Du starter din undersøgelse under det lavkraftige olie-objektiv, som vil være 40, 43 eller 45, afhængigt af dit mikroskop.

4. Sving det lavkraftige olie-objektiv rundt og sænk det ved brug af de grove justeringsknapper på mikroskopet, indtil det lige rører dråben af immersion olie på glasset. Sænk objektivet ind i dråben, ved brug af den fine justeringsknap. Kig i mikroskopets okular og justér fokus langsomt, kun ved brug af den fine justeringsknap. Røde celler vil vise sig som små, røde, bi-konkave skiver – der bør være mange af dem. Hvide blodceller vil være større end røde celler, færre i antal, og sprunget ud over felterne af røde celler. Hvide celler har generelt en stor purpur kerne omgivet af blå, rosa eller gråblå cytoplasma, afhængigt af hvilke hvide celler der er til stede. De primære hvide celletyper, du bør være i stand til at se, inkluderer neutrofiler, lymphocyter, monocyter, eosinofiler og basofiler. Blodplader vil vise sig som små purpur pletter spredt blandt cellerne.

5. Når den indledende fokusering og scanning er udført med det lavkraftige olie-immersionsobjektiv, bør det højkraftige olie-objektiv omhyggeligt roteres ind i olie-dråben på glasset. Dette objektiv giver den største forstørrelse (95, 97 eller 100, afhængigt af dit mikroskop) og bruges til at undersøge celler mere nøje for inklusionslegemer, mikroorganismer og strukturelle afvigelser. Kun mindre justeringer af fokus bør være nødvendige – og kun med den fine justeringsknap. Du kan have brug for at gøre justeringer af lyskilden for at lette visningen – at hæve kondensoren og åbne iris-diaphragmaet vil give et lysere billede.

6. Efter at blodglasset er blevet undersøgt, roter det lavkraftige objektiv ind i position, fjern glasset fra mikroskopscenen, og tør alle spor af olie fra linserne og fra mikroskopscenen.