DNA ekstraktionsprocedurer

DNA er opskriften på livet; inden for sine milliarder af koder lægge grunden til organismer. Den undersøgelse og analyse af DNA - i alt fra slægtsforskning til strafferetlig efterforskning - er blevet meget almindeligt . For at undersøge DNA , selvom det først skal udvindes fra en prøve . Uanset om det er en hårlok eller en smule blod , kan DNA findes i næsten alt, der gør op en organisme og dens ekstraktionsprocedurer er blevet perfektioneret gennem årtier .
Cellelyse

Lysis er den handling, hvorved celler er bogstaveligt brudt, forårsager deres indhold til spill ud til analyse. De celler, der indeholder DNA-prøven , der skal ekstraheres skal åbnes , hvilket tillader os at opnå adgang til lysatet , eller væsken indeni. Dette opnås ved flere metoder , den mest almindelige er sonikering . Lydbehandling er den proces, hvor kondenseret lyd påføres cellerne , således at ryste dem og bryde deres intermolekylære reaktioner. Andre metoder til at inducere lysis omfatte indføre en virus , som bryder det åbne indefra; enzymer, som spiser væk på dens overflade; og osmose, hvilket indebærer at placere cellerne i vand , så væsken inde i dem for at gøre sin væk til ydersiden , hvor det kan udvindes.
Membran Fjernelse

Dernæst skal lipiderne omkring cellens membran fjernes. Lipider er typer af fedtstoffer, voks , monoglycerider , phospholipider og andre naturligt forekommende molekylære stoffer, der anvendes som strukturelle komponenter til cellemembraner , hvilket giver dem nogle stivhed . Disse fjernes ved at vaske cellernes lysat i et rengøringsmiddel, som regel en form for chromsyre .
Protein Removal

Efter lipider med succes er blevet fjernet fra lysat , er det nu vigtigt at fjerne eventuelle resterende proteiner. Dette opnås ved tilsætning af hvad der er kendt som en protease . En protease er et særligt enzym, beregnet til at nedbryde de givne proteiner. Denne handling kaldes proteolyse , mens protease forårsager hydrolyse ( nedbrydning ) af de obligationer, der holder aminosyrer sammen . Aminosyrer udgør proteiner og uden deres konfiguration , proteinet nedbrydes .
Fældningen
p Det er endelig tid til at se den rent DNA . Dette kan gøres ved at dyppe lysatet i iskold alkohol , sædvanligvis ethanol. Da DNA er uopløseligt i alkohol, det vil klumpe sammen . Når blandingen omrøres med en metal ske, vil DNA synligt wrap omkring metallet , der ligner hvid bomuld . Dette er kendt som fældningen , med DNA kaldes DNA- bundfald.
Isopropanol

Sammen med ethanol, isopropanol også lejlighedsvis anvendes ikke udtrække DNA bundfald. På den positive side , det er mere effektivt end ethanol , hvilket gav en højere koncentration af DNA , når det anvendes . Men det er også langt mindre flygtige og kræver mere tid til at tørre . Det kan også bemærkes, at DNA ikke kan klæbe så godt til skeen eller røret, når du bruger isopropanol.
Hoteltilbud