Formål med Protein Expression Analysis

ekspression af proteiner er meget enkelt produktion af et protein fra en defineret aminosyresekvens , som igen er bestemt af en defineret gensekvens. Forståelsen af ​​disse sekvenser tillader en investigator at ændre et protein i forskellige måde - for eksempel ved at placere en fluorescerende tag på protein , så det kan påvises , eller ved at fjerne dele af det protein, der kan interferere med sin produktion eller forarbejdning af en celle .

metoder og værktøjer til analyse af Protein Expression

Proteinekspression analyseres ved hjælp af meget avancerede og specialiserede teknologier og-procedurer , såsom ELISA , Immunoassays , massespektrometri , og billeddannelse. I de fleste tilfælde proteinet indirekte påvist - for eksempel ved anvendelse af et antistof , der binder til det, og derefter ved hjælp af et sekundært system til påvisning af at visualisere det. En basisk protein detektion er teknikken med Western blotting , hvor et protein køres gennem en agarosegel og overføres derefter til en membran. Det er derefter " probes " ved at lade et antistof til at binde til det, og antistoffet omsættes derefter med en kemisk opløsning , såsom en sølvfarve , at producere et billede af proteinet placering på blottet . Dette giver en indikation af størrelsen af proteinet og om det er til stede som flere eller enkelte enheder. En anden almindeligt anvendt metode er fluorescenspåvisning . Den binding af et antistof mærket med et fluorescerende partikel til protein vil gøre det muligt at visualiseres ved mikroskopi.
At analysere Protein Expression

studere ekspressionen af ​​et protein giver en investigator angivelse af, hvor det fremstilles (dvs. dens ekspressionsmønster og lokalisering ) eller dennes mængder ( dvs. dets væv eller cellulære niveauer ) . Denne information bruges i diagnostisk patologi , for eksempel til påvisning af urinprotein bestemme, om en patient har nyresygdomme såsom renal tubulær sygdom eller diabetisk nefropati. I genetiske laboratorier genkloning eksperimenter normalt generere rekombinant ( genetisk ændrede ) proteiner . Analysen af ​​disse syntetiske molekyler er afgørende for at kontrollere gensekvenser eller kontrollere for mutationer, som måske eller måske ikke være ønskelig. For eksempel vacciner er proteiner produceret af kunstigt modificerede enheder af gener. Disse proteiner skal analyseres nøje for at sikre , at de gener blev ændret i den korrekte og ønskede måde , for at undgå uønskede bivirkninger eller toksiske virkninger .
Protein Expression Analyse ved Western blot

analyse af protein-ekspression ved hjælp af Western-blotting er en meget rutinemæssigt laboratorieprocedure , for forskere at evaluere genkloning og produktion af rekombinante proteiner . For eksempel i molekylærbiologi og gensplejsning , gener fra forskellige arter (såsom mus og mennesker) er forbundet med hinanden og anbragt i en bakteriecelle , som er i stand til at udtrykke proteinet. For at sikre , at det korrekte protein bliver genereret , skal dets ekspression analyseret ved western blotting . Western blotting bruges også i medicinsk patologi at diagnosticere kogalskab og HIV.
Protein Expression Analyse ved flowcytometri

Flowcytometri kræver celler, der skal farves med et fluorescerende antistof , som binder til et protein, der udtrykkes på overfladen af ​​eller inde i en celle . Det anvendes i farmaceutisk forskning for at finde molekyler ( cytokiner) , der er unikke for et bestemt sæt af celler og er involveret i celle signalering og kommunikation. Dette er vigtigt, så effekten af ​​narkotika på normal celle fysiologi og funktion kan overvåges under lægemiddeludvikling og kliniske forsøg .
Hoteltilbud