Perfusion Teknik

Perfusionen teknik giver hurtig og ensartet fiksering til alle individuelle celler til stede i vævet. 4 procent paraformaldehyd fixativ føres via det vaskulære system for at opnå væv af interesse . Den vigtigste målsted til administration lægemiddel i et bestemt organ kan identificeres ved hjælp af denne teknik. Perfusion har også hjulpet forskerne til at forstå den strukturelle og funktionelle organisation af den menneskelige hjerne . Ting du skal
Animal ( rotte eller abe)
perfusion , bægeret
Fixative ( 4 procent paraformaldehyd )
sprøjtenåle
Perfusion drop sæt
Saks
Skalpel
Tang
0,9 procent saltvand Salg Ice kasse,
Vis Flere Instruktioner
1

Forbered frisk 4 procent paraformaldehyd ved at blande 40 g paraformaldehyd i 800 ml vand . Opløsningen opvarmes til 60 ° C under omrøring. Opløsningen afkøles til 4 ° C. pH-værdien justeres til 9,5 ved hjælp af et pH-meter . Til justering af pH, tilsættes iseddike til at opnå den ønskede pH
2

Opsæt perfusion pumpe . Vedlægge alle glasdele og en perfusion nål. Kør 100 ml postevand gennem slangen af perfusion at fjerne eventuelle rester fra glas . Placer et bæger af fiksativ i en is boks .
3

Åbn enden af ​​perfusion rør og placere den i et fiksativ bæger . Skalere volumen af ​​opløsning efter størrelsen af dyret. Nu justere perfusion pumpe ventil til en langsom, stabil drop. Luk ventilen . Fyld perfusion apparat med 0,9 procent ( vægt /volumen) saltvandsopløsning .
4

Opsæt kirurgi instrumenter nær operationsbordet. Giv et anæstesi injektion til dyr ifølge sin kropsvægt ( ketamin 0,5 mg /kg). Placer dyret på operationsbordet med bagsiden nedad .
5

Lav et snit med en skalpel , langs længden af ​​mellemgulvet. Med de store saks , stumpt nedad , skæres bindevævet i bunden af membranen . Blotlægge hjertet . Hold det bankende hjerte med pincet og indsætte en nål i venstre ventrikel.
6

Åbn ventilen af perfusion til at tillade strømmen af ​​0,9 procent saltopløsning . Sørg for, at den løsning, flyder frit, og dyret er i live. Hjertet af dyret bør løbende slå . Når blodet erstattes af saltvandsopløsning, ændre løsningen på 4 procent paraformaldehyd .
7.

Stop perfusion og dissekere et væv af interesse. Hold væv i samme medium ved 4 C.
hoteltilbud